稻瘟病菌中一个假定的MgRhoGef1蛋白的功能初探

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Rho1是小G蛋白Rho族的一个重要成员,它存在两种相互转化的状态:GDP结合的失活状态和GTP结合的活性状态。GDP/GTP交换因子(GEF1)的功能是促进Rho1从GDP结合态向GTP结合态的转换。本研究首先通过生物信息学的方法对MGG12644这个基因的理论等电点、分子量、结构域以及功能等进行预测分析,结果显示该基因是小G蛋白Rho1的GEF,同时该基因的变化与物种的进化相吻合。然后以稻瘟病菌为模式生物,通过同源重组的方法得到该基因的敲除突变体,发现该基因的缺失突变体虽然生长速度缓慢,然而隔膜间距与野生型相比却无明显差异,说明该基因可能参与了细胞分裂周期的调控。突变体在加有SDS的淀粉培养基中的生长速度受到抑制,说明对SDS的耐性能力降低。此外,突变体不能产生分生孢子,菌丝末端虽然可以分化生成附着胞,但产生的附着胞的数量也很少且附着胞丧失了侵染洋葱表皮及水稻叶片的能力,因而在造伤和非造伤的叶片上都不能形成病斑。这些表型都受到Rho1的调控,因而推测该基因与Rho1的功能有关。将带有启动子的MgRhoGEF1基因转入缺失敲除突变中,突变体的表型得以恢复,说明敲除突变体表型的出现是由于MgRhoGef1的缺失直接或间接导致。利用酵母双杂交的方法证实了MgRhoGef1及其结构域都能与Rho1互作,因而对MgRhoGef1的研究有利于了解Rho1的功能,完善对Rho1的认识。又由于MgRhoGef1的缺失导致稻瘟病菌丧失致病能力,因而有可能通过该基因的研究找到合适药物靶标,为稻瘟病的防治提供新的策略。
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