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目的:采用单侧输尿管梗阻(UUO)方法构建大鼠肾间质纤维化模型,以苯那普利为对照药物,观察中药复方肾纤康颗粒对UUO模型大鼠肾功、肾小管间质损伤指数、肾间质纤维化程度以及对Wnt/β-catenin信号转导通路的影响,探讨肾纤康颗粒抗肾间质纤维化的作用及其机制。方法:将60只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(SOR组)、UUO模型组(UUO组)、UUO模型+苯那普利治疗组(洛汀新组)、UUO模型+肾纤康颗粒治疗组(肾纤康组),每组15只。SOR组仅切开腹腔而不结扎输尿管,其余各组均构建UUO模型,从术后第一天开始给药,肾纤康组给予肾纤康颗粒(4.2g/kg?d)灌胃治疗,洛汀新组给予苯那普利(10mg/kg?d)灌胃治疗,SOR组和UUO组给予等体积蒸馏水灌胃。分别于术后第7天、14天和21天每组随机选择5只大鼠处死,称取大鼠肾重和体重,计算肾脏肥大指数(肾重/体重,KW/BW),检测24小时尿蛋白定量、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾脏HE及Masson染色,采用免疫组织化学染色法和Western blot检测肾组织Wnt4、β-catenin和α-SMA蛋白的表达,Real time PCR检测肾组织Wnt4、β-catenin和α-SMA m RNA的表达水平。结果:1.体重及KW/BW变化:与SOR组相比,其余各组大鼠各时间点体重均减轻,而KW/BW升高(P<0.05);与UUO组相比,肾纤康组和洛汀新组体重各时间点均明显升高,KW/BW在第7天和14天明显降低(P-2-<0.05),而在第21天较UUO组升高(P<0.05);肾纤康组和洛汀新组治疗效果相当(P>0.05)。2.24小时尿蛋白定量:每组大鼠各时间点24小时尿蛋白定量组内比较和组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。3.肾功能指标:与SOR组相比,其余各组大鼠各时间点Scr和BUN均有不同程度升高(P<0.05);与UUO组相比,肾纤康组和洛汀新组Scr和BUN水平均明显降低(P<0.05);肾纤康组与洛汀新组相比差异无统计学意义(P>0.05)。4.肾脏病理变化:HE和Masson染色显示,SOR组各时间点肾小球和肾小管形态正常,未见肾纤维化病理改变;其余各组肾皮质逐渐变薄,可见不同程度肾小管管腔萎缩或闭塞、上皮细胞空泡变性和炎性细胞浸润,间质中蓝染胶原纤维逐渐增多,21天达到高峰;与SOR组相比,其余各组大鼠各时间点肾小管间质损伤指数和胶原染色阳性面积均明显增加(P<0.05),与UUO组相比,肾纤康组和洛汀新组各时间点肾小管间质损伤指数和胶原染色阳性面积均明显降低(P<0.05),肾纤康组与洛汀新组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。5.免疫组织化学染色检查5.1α-SMA:SOR组中α-SMA仅在肾小球血管平滑肌细胞上少量表达,各时间点表达无变化,其余各组大鼠UUO术后肾小管上皮细胞及间质细胞中可见阳性表达,随着梗阻时间延长表达逐渐增加(P<0.05);与UUO组相比,肾纤康组和洛汀新组各时间点表达明显减少(P<0.05);肾纤康组和洛汀新组比较差异无统计学意义(P>0.05)。5.2β-catenin和Wnt4:β-catenin和Wnt4在SOR组肾小管上皮细胞基底侧少量表达,随着时间延长表达均无明显变化,其余各组大鼠UUO术后在肾小管上皮细胞内的表达逐渐增加(P<0.05);与UUO组相比,肾纤康组和洛汀新组各时间点表达明显减少(P<0.05);肾纤康组和洛汀新组比较差异无统计学意义(P>0.05)。5.3相关性分析:UUO组肾组织β-catenin和Wnt4分别与α-SMA表呈正相关(r分别为0.982,0.934;P均<0.05)。6.Western blot检测Wnt4、α-SMA、β-catenin蛋白在SOR组大鼠肾脏中表达较低,而在UUO组中随着梗阻时间延长表达逐渐增加(P<0.05);与UUO组相比,肾纤康组和洛汀新组中上述蛋白表达均明显下降(P<0.05),肾纤康组和洛汀新组表达量差异无统计学意义(P>0.05)。7.Real time PCR检测Wnt4、α-SMA、β-catenin m RNA在SOR组有少量表达,UUO术后表达逐渐增高,21天达到最高;与SOR组相比,其余各组均明显升高(P<0.05),与UUO组相比,肾纤康组和洛汀新组肾组织中Wnt4、α-SMA、β-catenin m RNA量均明显下降(P<0.05),肾纤康组和洛汀新组表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.肾纤康颗粒可以降低UUO大鼠Scr、BUN、肾小管间质损伤指数及肾间质胶原纤维面积,作用效果与苯那普利相当。2.Wnt/β-catenin信号通路在UUO大鼠模型中活性增强,其关键信号蛋白β-catenin和Wnt4的表达与肾纤维化程度呈正相关。3.肾纤康颗粒可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路而减少α-SMA及胶原纤维的表达,延缓UUO大鼠肾间质纤维化进程。