茶尺蠖肠道细菌多样性及与茶叶中的EGCG之间相互关系的研究

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昆虫肠道菌群在宿主取食、消化、免疫和生长等方面都具有重要的作用。本研究旨在揭示茶尺蠖寄主食物-肠道菌群-茶尺蠖生长发育三者之间的关系。主要研究结果如下:1.饲料类型对茶尺蠖幼虫存活率和肠道菌群结构的影响该部分实验中,比较纯人工饲料和茶鲜叶饲喂对茶尺蠖幼虫生长肠道菌群的影响。结果显示:饲喂纯人工饲料的幼虫存活率(62.86%)显著低于茶鲜叶饲喂的幼虫存活率(100%)。二代测序技术分析幼虫的肠道菌群结构:在门的水平上,两组饲喂处理的幼虫肠道菌群组成结构相似,饲喂纯人工饲料的幼虫肠道菌群主要由厚壁菌门 Firmicutes(78.59%)、变形菌门 Proteobacteria(10.44%)和拟杆菌门Bacterioidetes(2.88%)组成;饲喂茶鲜叶的幼虫肠道菌群也是由厚壁菌门Firmicutes(79.62%)、变形菌门Proteobacteria(8.44%)和拟杆菌门Bacterioidetes(3.32%)组成;在属的水平上,两组饲喂处理的幼虫肠道菌群结构略有差异,饲喂纯人工饲料的幼虫肠道菌群主要由肠球菌属Enterococcus(74%)、魏斯式菌属Weissella(1.54%)和链球菌属Streptococcus(0.86%)组成;饲喂茶鲜叶的幼虫肠道菌群主要有肠球菌属(75.50%)、红球菌属Rhodococcus(0.75%)和紫单胞菌属Parabacteroides(0.67%)组成;同时,饲喂纯人工饲料的幼虫肠道菌群多样性和丰富度显著高于饲喂茶鲜叶的幼虫。2.不同茶叶成分对茶尺蠖幼虫生存的影响该部分实验中,在纯人工饲料中分别添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%六个浓度梯度(饲料中 EGCG 的最终浓度)的(-)-epigallocatechin-3-gallate(EGCG,98%)和0.5%、1%两个浓度(饲料中咖啡碱的最终浓度)的咖啡碱(Caffeine,99%)。用处理过的饲料饲喂三龄茶尺蠖幼虫,观察并统计幼虫的存活率。结果表明:低浓度(0.5%、1%、1.5%和2%)EGCG饲料饲喂的幼虫将存活率从62.86%提高到88%以上,高浓度(2.5%和3%)EGCG饲料饲喂的幼虫存活率不高,当添加的EGCG浓度达到3%时,幼虫全部死亡。咖啡碱则不利于幼虫生存。3.EGCG对茶尺蠖生长适合度的影响及其原因该部分实验中,比较在纯人工词料中添加1%EGCG对茶尺蠖生长发育和肠道菌群结构的影响。结果表明:纯人工饲料中添加1%EGCG显著提高幼虫的各项营养指标。二代测序技术分析两组处理的幼虫肠道菌群结构:EGCG处理显著降低幼虫肠道菌群结构的丰富度和多样性。用菌落计数和实时荧光定量的方法比较两组幼虫肠道细菌的数量,发现EGCG可以显著降低幼虫肠道细菌的数量。本次研究证实:改变茶尺蠖幼虫的寄主食物类型,显著影响幼虫的存活和肠道菌群的结构;茶鲜叶中的EGCG在一定浓度范围内能促进幼虫生长,其促进机制可能与EGCG的抗菌作用相关。
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