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1.对花生组织培养进行研究,并建立了其高效植株再生体系.(1)以花生品种8823、白沙果及河南农家品种成熟种胚发芽7d的幼叶为外植体,研究不同激素及其配比对花生不定芽、体细胞胚、花芽及植株再生的影响。结果表明:从添加NAA和BAP的诱导培养基上,转至添加BAP和ABA的再分化培养基上,获得了50%-100%的不定芽发生率;当将不定芽进一步转移至植株再生培养基上时,植株再生率最高可达100%。在添加2,4-D和BAP的诱导培养基上进行培养,89%-100%的外植体脱分化形成胚胎发生丛(一团具有很强分裂能力的细胞团及发育成体细胞胚的潜力),转移至添加BAP和ABA的再分化培养基上时,43%-100%的外植体形成体细胞胚,当将体细胞胚进一步转移至植株再生培养基上,植株再生率最高可达96%。在添加NAA和BAP的基础上,添加GA3,有利于花芽的分化,花芽分化的最高频率为96%。(2)通过对不同花生品种及不同外植体进行不定芽的诱导,发现不同花生基因型和不同的外植体产生不定芽的频率存在较大差异。
2.对花生原生质体分离与培养条件进行研究。以花生品种8823、白沙果的体细胞胚及野生种Arachiscannadacii的嫩茎为供体,用含有PectolyaseY-23(0.1%)和CellulaseonozukaRS(2.0%)的酶液处理7小时左右,获得大量的原生质体。将原生质体培养在添加1mg/LNAA和6mg/LBAP的改良MS液体培养基中,培养约2-3天后,可观察到细胞分裂,并形成细胞团。继续培养,形成小愈伤组织。
3.对花生与其近缘野生种间细胞融合及培养方法进行研究。将花生品种8823的体细胞胚与其近缘野生种Arachiscannadacii嫩茎分离得到的原生质体,用PEG方法融合,经筛选培养后,可观察到细胞分裂,并形成小愈伤组织。