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红树林是指自然分布在热带、亚热带海岸潮间带的木本植物群落,通常生长在港湾河口地区淤泥质滩涂上。红树林沉积物具有强酸性、强还原性、高有机质、高含盐量等特征,蕴含着极为丰富、极具特色的微生物资源。然而,目前对红树林的研究多集中在植物学、生态学、造林学等领域,在红树林沉积物真菌的研究甚少。红树林沉积物真菌是一个重要的生物资源库,是农业、医学和工业所需新型天然活性物质的重要来源。 本研究以福建漳江口红树林国家级自然保护区红树林沉积物为研究对象,利用可培养分离法研究红树林沉积物中真菌类群组成多样性,并利用平板共滞法进行抗茶叶病原真菌的活性筛选,CCK8 法进行肿瘤细胞毒活性筛选。同时通过人工诱变方法对茶叶病原真菌Pestalotiopsis theae进行致病缺陷诱变。 通过对8个样品分离培养得到1276株,初步整理为135株真菌,通过形态学和Internal Transcribed Spacer of ribosomal DNA(ITSrDNA)序列测定进行鉴定,并建立了系统进化树进行多样性分析分析,子囊菌门真菌占据红树林沉积物真菌群落的绝大部分(91.5％),而担子菌门占2.1%,接合菌门占6.4%。所得真菌归为47个种系型,分属于17个属,其中青霉属和曲霉属为优势菌属,总样品的Shannon-Wiener 和 Simpson 多样性指数为 4.01和0.901,均匀度为0.795,显示出丰富的多样性；利用平板共滞法对真菌代谢产物进行抗茶叶病原真菌生物活性实验发现：共有 22 株(占 46.8%)具抗真菌活性,活性菌中抑制Pestalotiopsis theae LH13的真菌17株,抑制Colletotrichum gloeosporioides LH30的真菌14株,抑制Neofusicoccum sp. LH107的真菌9株。这些菌株分布在7个属,其中以青霉属、镰孢属、木霉属、曲霉属为主。用 CCK8 法检测 47 株红树林沉积物来源真菌发酵液粗提物的细胞毒活性,以 100μg/ml的浓度下抑制率大于 70%为阳性为判断标准,统计发现阳性率14-19%,其中BEL7402(肝癌)阳性6株、HT1080(纤维肉瘤)阳性9株、Hl60(急性早幼粒细胞白血病)阳性7株。以孢子致死率70-85%为依据对Pestalotiopsis theae LH13进行紫外诱变,通过健康茶叶叶片致病性实验筛选出致病缺陷型菌株3株和减毒株19株。 本文的研究工作对探明海洋真菌在我国红树林生态系统的群落结构,有效利用和保护红树林微生物资源,开发新型药物先导化合物和生物农药奠定了基础。