研究背景：二十五味珊瑚丸是传统藏药,在公元18世纪由藏医学创使人宇拓.元丹贡布创制,收载于藏医著名经典著作《四部医典》,至今已有一千二百多年的临床应用历史,是藏医名贵珍宝药品,1997年被国家卫生部批准为国家中药保护品种,目前《中国药典》(2015版)收载。二十五味珊瑚丸具有清热定惊、开窍通络、止痛等功效,用于治疗“白脉病”,症见神志不清,身体麻木,头晕目弦,脑部疼痛,血压不调,头痛、癫痫及各种神经性疼痛,现代临床上主要用于脑血管和脑神经疾病,如癫痫[1]、脑中风[2]、偏头痛[3]等。该处方虽然已有上千年的历史，但是，到目前为止，对藏药二十五味珊瑚丸只有西红花、红花主要成分的薄层色谱鉴别以及乌头碱、硫化汞、马兜铃酸A的含量测定，对于毒理学研究和质量标准研究所涉及的相关论文较少，为了完善其相关的质量评价标准以及安全性评价提供一定的依据。　　研究目的：对经典藏药二十五味珊瑚丸进行急性、亚急性毒性反应的初步研究，检测其药物的安全性；测定二十五味珊瑚丸中的主要指标成分羟基红花黄花素A、马兜铃酸A、重金属及硫化汞的含量，形成比较规范的安全性评价模式，为藏药二十五味珊瑚丸的质量评价提供一个参考，也为临床安全合理的用药提供一定的依据。　　研究方法：1.急性毒性实验：按最大耐受量（MTD）测定法，分别采用昆明种小鼠和SD大鼠各20只，雌雄各半，灌胃给药37.25％二十五味珊瑚丸CMC混悬液，一日三次（总容量为120ml/Kg），总剂量为44.70g/Kg（相当于原生药44.70g，为临床成人拟推荐用药剂量（1g/d）的2682倍。）。2.亚急性毒性实验：实验采用SD大鼠80只，雌雄各半，区分性别、随机分为对照组及二十五味珊瑚丸0.1852g/kg、0.3704g/kg和0.7408g/kg剂量组（分别为成人临床使用量的25倍，50倍，100倍），连续给药30天，停药24小时后分别取样进行血液学、血液生化学及病理组织学检查。3.采用《中国药典》2010版一部附录重金属检查法和硫氰酸铵滴定法分别测定重金属总量和硫化汞的含量；采用一般鉴别试验对可溶性汞盐进行了检查。4.采用HPLC法测定马兜铃酸的含量,色谱柱：Kromasil C18（4.6×200mm）；流动相：甲醇-0.05%冰醋酸（62：38）；检测波长：250nm；柱温：30℃；流速：1mL/min。5.采用色谱条件为Agilent Polaris NH2柱(250mm×4.6 mm，5μm)；甲醇26%-乙腈2%-磷酸水72%(PH=2.5)作为流动相；流速1.0 m L/min；柱温25℃；检测波长：403nm;进样体积：10μL进行检测，精密制备对照品和供试品溶液，并通过线性关系考察、精密度、稳定性和重复性实验以及加样回收率试验后进行样品检测并得出结果。　　研究结果：1.急性毒性试验：小鼠、大鼠分别灌胃二十五味珊瑚丸44.7g/kg，相当于临床用药量的2682倍，动物未见严重毒性反应，亦无动物死亡。实验结果提示，二十五味珊瑚丸无明显急性毒性反应，二十五味珊瑚丸给小鼠、大鼠灌服的最大耐受量均为44.7g/kg。2.亚急性毒性实验：二十五味珊瑚丸30天连续给药对大鼠免疫功能及肝、肾、肺组织均有不同程度的影响和损害，可引起毒性反应，呈现出一定的剂量依赖性，主要毒性靶器官为肝、肾、肺，提示二十五味珊瑚丸不宜长期大量服用。3.二十五味珊瑚丸中重金属总量达200～225ppm；硫化汞平均回收率为99.64%，RSD=1.64％(n=6)，含量为29.75mg/g；未显汞盐的鉴别反应。4.二十五味珊瑚丸中未检出马兜铃酸A。5.测定出二十五味珊瑚丸中羟基红花黄色素A含量范围为1051.19μg/g--464.62μg/g，建议其含量标准应基本控制在530μg/g左右。