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研究背景及研究目的:研究对一典型家族性胃癌进行追踪调查及全外显子组测序,发现家族性胃癌患者的共同突变基因RAD54B p.N593S。目前研究表明RAD54B在多种肿瘤中表达异常,被认为是多种肿瘤患者预后不良的分子指标,但RAD54B及其突变体RAD54B N593S在胃癌中的作用及调控机制尚不清楚。本研究旨在通过分析RAD54B N593S在体外细胞和体内裸鼠中的生物学功能,探讨RAD54B N593S促进胃癌进展的潜在分子调控机制。研究方法:通过分别构建FLAG-RAD54B野生型(FLAG-RAD54B-WT)和HA-RAD54B N593S突变型(HA-RAD54B-MUT)质粒,分别在低分化胃腺癌细胞BGC-823和MKN-45以及胃黏膜上皮细胞GES-1细胞系中表达。采用CCK-8及平板克隆形成实验用于检测RAD54B N593S对胃癌细胞活力和增殖能力的变化;Transwell小室试验、细胞划痕试验显示RAD54B N593S对BGC-823和GES-1细胞侵袭或迁移能力的影响;经放疗处理后,通过平板克隆、流式细胞术、免疫荧光(Immunofluorescence staining,IF)及蛋白质印迹实验(Western blot,WB)检测RAD54B N593S促进胃癌细胞DNA修复损伤的调控机制;体内裸鼠实验验证RAD54B N593S对胃癌细胞恶性生长及转移能力的影响。结果:全外显子组测序鉴定家族性胃腺癌RAD54B N593S突变型基因;分子生物学实验结果表明表明RAD54B N593S显著促进GES-1细胞和BGC-823胃癌细胞的增殖、侵袭迁移能力;在YAP1表达缺失的MKN45低分化胃癌细胞中RAD54B N593S的显著促进的调控作用丧失。而后,经放疗处理后,进行平板克隆、流式细胞术、免疫荧光及蛋白质印迹实验表明RAD54B N593S促进胃癌细胞DNA修复损伤,并且部分依赖YAP1的调控机制;体内裸鼠实验进一步验证RAD54B N593S显著促进胃癌细胞恶性生长和转移的生物学功能。结论:本研究揭示RAD54B N593S在家族性胃癌发生发展中的重要作用,可能为胃癌的诊疗提供新的潜在治疗靶点。