铜是生物体的一种必需微量元素,是许多重要酶的辅基成分,参与生长发育等一系列生物过程。铜蓝蛋白(Ceruloplasmin, EC1.16.3.,缩写为CP)是机体内比较重要的含铜酶之一,主要分布于动物的血液中, CP结合了血浆中95%以上的铜。CP可以向机体各种组织细胞快速提供高效可利用的铜,以满足各器官组织对铜的需要。铜蓝蛋白主要参与动物体内铜的转运、细胞铁的代谢、自由基的清除、胚胎及神经系统的发育、新生毛细血管的形成等过程。硫酸铜是常用的鱼类杀虫剂和灭藻剂,在水产养殖生产过程中,由于硫酸铜的大量使用或滥用,在动物体内大量富集,致其免疫系统损害严重,抗病力下降,甚至大量死亡。作为与机体内Cu2’浓度息息相关的应急反应蛋白CP,测定其表达量,可为临床硫酸铜的合理用药提供最佳浓度和最佳时间,并为硫酸铜对黄河鲤的致毒性提供一种分子标记,提出理论依据。黄河鲤是我国北方的重要经济鱼类,因此用黄河鲤作为研究对象,来研究不同浓度硫酸铜对铜蓝蛋白mRNA表达的影响,对于揭示硫酸铜对黄河鲤的毒性作用、机体免疫、生长发育等的影响具有重要意义,为硫酸铜在渔业生产中的合理应用提供理论依据。本试验通过RT--PCR方法从黄河鲤组织中成功克隆山了黄河鲤铜蓝蛋白基因部分序列,长约244bp,填补了这一蛋白质核酸序列的空白。将本试验所获得的黄河鲤铜蓝蛋白基因的部分序列与NCBI上登录的不同物种的铜蓝蛋白的核酸序列进行对比分析发现黄河鲤铜蓝蛋白的核酸序列与鲫鱼(Carassius auratus)的同源性最高,达到96%,与鳙鱼(Aristichthys nobilis)铜蓝蛋白核酸序列的同源性达到93%,与斑马鱼(Danio rerio)铜蓝蛋白核酸序列的同源性达到91%,但与其他物种相比发现,铜蓝蛋白核酸序列的同源性很低,表明铜蓝蛋白基因在不同物种间存在一定甚至是较大差异,在同一种属中同源性则较吊。半定量研究表明黄河鲤在不同浓度的水体铜刺激下,不同组织铜蓝蛋白的表达规律似,各组织中CP mRNA的表达量对Cu2+的刺激呈现时间依赖性以及剂量依存性,随着时间变化CPmRNA表达量存在先升后降的趋势,浓度越大CP mRNA表达量上升到峰值的时间越短。CP基因在黄河鲤6个不同的Cu2+浓度刺激下肝胰脏、鳃、脑、肾及肌肉等器官组织中均有不同程度的表达,其中以在肝胰脏组织中的表达最为丰富,而鳃中铜蓝蛋白的表达最少。初步揭示了CP基因在黄河鲤在铜曝露过程中可能参与铜的吸收和转运、促进免疫、调节机体铜代谢等功能。