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青光眼(glaucoma)是第二大致盲性眼病,眼内压增高是其发病的重要因素。青光眼所导致的严重的不可逆视功能损害,视网膜神经节细胞损伤是其根本原因,但关于青光眼的发病机制目前尚未完全阐明。瞬间受体电位(TRPC, canonical transient receptor potential)通道是一类非选择性阳离子通道,参与了神经系统众多的生理功能和疾病的病理过程。但其在视网膜的表达及在青光眼视网膜神经节细胞损伤中的作用还知之甚少。本课题利用免疫组织化学、Western blot、玻璃体显微注射、TUNEL凋亡染色等技术,首先研究了TRPC家族的7个亚族成员(TRPC1～7)在大鼠视网膜上的表达以及分布情况；进一步研究了TRPC6在慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞上的表达变化,分析了其在神经节细胞凋亡中的可能作用。主要结果如下：(1)利用免疫组织化学方法,检测至TRPC1～7七个亚族成员中有4种在大鼠视网膜组织上有表达丰富,这4种亚型分别是TRPC1、TRPC3、TRPC5和TRPC6;另外检测到TRPC2有微弱的阳性信号。利用Western blot方法,进一步验证了这些蛋白亚型在大鼠视网膜的表达。(2)为了确定这些TRPC亚型在视网膜细胞的定位,尤其是在神经节细胞和Muller细胞,我们利用CTB逆行标记神经节细胞,利用Muller细胞特异性标记物GS进行免疫双标实验,发现TRPC1、TRPC3、TRPC5的表达贯穿整个视网膜组织,包括神经节细胞和Muller细胞,而TRPC6主要分布在视网膜神经节细胞层,内核层也存在少量表达。(3)鉴于TRPC6在神经节细胞的选择性表达,以及TRPC6在神经细胞病理损伤中的作用,我们观察了TRPC6在大鼠慢性高眼压(COH)模型视网膜神经节细胞的表达变化,结果发现,TRPC6的表达在观察的术后6周时间内,与对照组相比没有显著的改变。然而,玻璃体显微注射TRPC6激动剂OAG或SAG,利用TUNEL染色技术观察其对视网膜铺片神经节细胞凋亡的影响,结果发现,OAG和SAG均可显著减少慢性高眼压视网膜TUNEL阳性信号的数目。此外,玻璃体注射TRPC非特异性拮抗齐SKF-96365对慢性高眼压视网膜TUNEL阳性信号的数目没有显著影响。综上所述,我们的研究发现,TRPC通道的TRPC1、TRPC3和TRPC5亚型在视网膜组织广泛分布,包括Muller细胞和神经节细胞;而TRPC6则在神经节细胞层(GCL)有选择性高表达,这一结果提示TRPC6可能参与调控神经节细胞的一些重要的生理功能。在大鼠慢性高眼压模型中,虽然TRPC6总蛋白量变化不显著,但其表达量一直处于较高的水平。内源性的TRPC6可能不参与高眼压神经节细胞的损伤过程,但TRPC6通道激动剂可显著降低慢性高眼压视网膜RGCs的凋亡,提示激活TRPC6可能具有神经保护作用。这一发现有助于增进我们对青光眼发病机制的认识,并可能成为治疗青光眼病变抑制神经节细胞凋亡的新靶点。