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为了制备出抗CPV-2a型犬细小病毒卵黄抗体,并对制备的抗体进行毒性安全性检测,选用由本实验室分离鉴定为CPV-2a的犬细小病毒,将其在猫肾细胞上进行纯化、扩增,待出现明显病变后收集病毒,纯化浓缩后作为制备抗体的病原。将病原稀释到30μg/mL剂量与佐剂按1：1体积比混合,乳化完全后免疫25周龄的开产蛋鸡。同时选用疫苗毒株和疫苗毒、CPV-2a毒株的混合组作为实验的对比实验组。将18只25周龄的青脚麻肉蛋兼用型鸡随机分为三组,分别免疫CPV-2a(1组)、CPV-2(2组)和二者联合免疫(3组)各三次,收集鸡蛋。使用改良后水稀释—硫酸铵沉淀法来提纯制备获得的卵黄抗体,并对提纯的样品使用紫外分光光度法、SDS-PAGE、血凝抑制试验检测其纯度和效价,同时绘制抗体效价消长规律曲线。通过HI实验、紫外分光光度法测定三组抗CPV-2a卵黄抗体的效价分别为214、212、211,纯度分别为91%、91%、90.7%。对测得抗体效价进行统计学分析,1、2组P<0.01,差异极显著,具有统计学意义。1、3组P<0.01,也具有极显著的统计学差异。从绘制的抗体效价消长规律曲线可以获知在首次免疫后一周左右即可在卵黄中检测到CPV抗体。在对鸡进行加强免疫后,抗体的效价达到峰值222,此后的抗体效价会稳定在212-218范围内,并维持在此水平3-6个月。最后一次免疫后一个月,再次检测,抗体效价未见有明显下降,仍可达到215。将获得的卵黄抗体在小鼠上进行急性毒性试验、亚急性28天喂养实验,小鼠生殖遗传毒性试验,以检测所制备抗体的安全性。急性毒性实验结果显示每只小鼠经口LD50均大于20mL/kg bw,该卵黄抗体属无毒级。亚急性毒性实验结果中,实验组小鼠同正常对照组小鼠比较,各项检测指标均在正常范围内,未发现抗体有明显的慢性毒性作用。微核实验和精子畸形实验中,两组实验结果均显示为阴性表明被检的抗CPV-2a卵黄抗体对哺乳动物体细胞染色体和生殖细胞无损伤,即无遗传毒性。实验结果表明抗体安全无毒,可以进一步的应用于食品添加剂和临床治疗通过本研究获得了制备抗CPV-2a卵黄抗体的方法,并对传统的卵黄抗体的提纯方法进行了一定的改良,使得卵黄抗体的提纯成功率大大提高,为制备其他抗原卵黄抗体提供一定的参考思路。同时对抗体的安全性进行了检测,为卵黄抗体的进一步应用打下了基础。