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目的：多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种起源于B淋巴细胞并能分泌大量单克隆免疫球蛋白的恶性浆细胞病,目前仍属一种难治性疾病。大量研究表明表观遗传学的失衡与多发性骨髓瘤的发生具有密切关系。本实验主要研究雷公藤内酯醇(triptolide, TPL)对多发性骨髓瘤细胞RPMI8226的细胞增殖,细胞周期阻滞,细胞凋亡,组蛋白H3、H4乙酰化,组蛋白H3K9、H3K27甲基化水平以及相应组蛋白去乙酰化酶、组蛋白甲基化酶的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法：采用MTT比色法检测雷公藤内酯醇作用后多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的增殖活性,并与外周血单个核细胞作比较,PI单染法流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术、TUNEL检测细胞凋亡,分光光度法检测Caspase-3和Caspase-9活性,Western blot免疫印迹技术检测组蛋白H3、H4乙酰化,组蛋白H3K9、H3K27甲基化水平以及HDAC8、SUV39H1和EZH2蛋白的表达,RT-PCR和Real-time RT-PCR技术分别检测hdac8和suv39h1、ezh2的基因水平,免疫荧光共聚焦观察HDAC8、SUV39H1和EZH2的亚细胞定位和表达。结果：雷公藤内酯醇能明显抑制RPMI8226细胞的增殖,其抑制作用呈时间、剂量依赖性,36h、48h和72h的的IC50值分别为(105.37±0.19)、(76.89±0.02)和(39.17±0.13)nmol/L;能引起RPMI8226细胞的G0/G1细胞周期阻滞；诱导RPMI8226细胞capsase-依赖性凋亡；能明显升高组蛋白H3和H4的乙酰化水平,降低组蛋白H3K9me3和H3K27me3的甲基化水平；经雷公藤内酯醇干预后,RPMI8226细胞HDAC8, SUV39H1和EZH2蛋白和mRNA水平均明显下降。结论：雷公藤内酯醇能够明显抑制RPMI8226的增殖,引起G0/G1细胞周期阻滞,并能诱导凋亡；通过降低RPMI8226细胞HDAC8的表达从而提高组蛋白H3和H4的乙酰化水平,通过抑制RPMI8226细胞SUV39H1和EZH2来降低组蛋白H3K9me3和H3K27me3的甲基化水平,这可能是雷公藤内酯醇抗多发性骨髓瘤作用的机制之一。目的：本实验主要研究雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤细胞U266的细胞增殖,细胞周期阻滞,细胞凋亡,组蛋白H3K4、H3K27和H3K36甲基化水平以及相应组蛋白甲基化酶的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法：采用MTT比色法检测雷公藤内酯醇作用后多发性骨髓瘤U266细胞的增殖活性,PI单染法流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术,分光光度法检测Caspase-3和Caspase-9活性,Western blot免疫印迹技术检测组蛋白H3K4、H3K27和H3K36甲基化水平以及SMYD3.EZH2和NSD1蛋白的表达,RT-PCR分别检测smyd3、ezh2和nsd1的基因水平,免疫荧光共聚焦观察SMYD3、EZH2和NSD1的亚细胞定位和表达。结果：雷公藤内酯醇能明显抑制U266细胞的增殖,其抑制作用呈时间、剂量依赖性；能引起G2/M期细胞周期阻滞；诱导capsase-依赖性细胞凋亡；降低组蛋白H3K4me3、H3K27me3和H3K36me3的甲基化水平；经雷公藤内酯醇干预后,U266细胞SMYD3、EZH2和NSD1蛋白和mRNA水平均明显下降。结论：雷公藤内酯醇能够明显抑制U266细胞的增殖,引起G2/M期细胞周期阻滞并能诱导凋亡；通过降低U266细胞组蛋白甲基化酶SMYD3、EZH2和NSD1的表达从而降低组蛋白H3K9me3和H3K27me3的甲基化水平,这可能是雷公藤内酯醇抗多发性骨髓瘤作用的机制之一。目的：本实验主要研究雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤U266细胞的细胞凋亡及其通过调控RIZ1对组蛋白H3K9mel甲基化水平的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法：Hoechst 33258染色法检测U266细胞凋亡,RT-PCR检测Caspase-3 mRNA表达,Western blot及流式细胞术检测RIZ1的蛋白表达,RT-PCR检测rizl的基因水平,Western blot检测组蛋白H3K9mel的蛋白表达,免疫荧光共聚焦观察H3K9mel的亚细胞定位及表达。结果：Hoechst 33258染色显示雷公藤内酯醇作用于U266细胞,可见典型的凋亡形态学改变如染色质浓缩、边缘化分割成块状,核膜裂解,出现凋亡小体。随着药物浓度的增加,凋亡细胞也随之数量增多；能上调U266细胞中RIZ1的蛋白和mRNA表达,并且具有明确的时效和量效关系；另外,RIZ1定位于U266细胞核内,雷公藤内酯醇作用后荧光强度显著升高。从而推测雷公藤内酯醇可能通过上调U266细胞RIZ1的表达,从而抑制U266细胞增殖和诱导凋亡。结论：雷公藤内酯醇抑制多发性骨髓瘤U266细胞增殖,诱导细胞发生caspase-依赖的凋亡。在U266细胞系中,RIZ1低表达,同时雷公藤内酯醇能够通过诱导RIZ1的表达上调组蛋白H3K9mel甲基化水平,这为探讨雷公藤内酯醇抗肿瘤机制提供一个新的视角。