大肠杆菌超突变子产生的分子基础及其在耐药性发生和转移中的作用

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超突变子的突变频率是正常菌株突变频率的1000倍以上,超突变子的出现,可能使细菌更适应目前治疗量的抗菌药物浓度,加速耐药性的产生。本研究首先测定了318株不同来源大肠杆菌对环丙沙星等12种抗菌药物的MIC、MPC,抑菌作用最强的是兽医临床上使用较少的AM,耐药率仅为0.94%,AMO、TET耐药率最高,达到90%以上:其中以耐6种抗菌药物的菌株数最多,达到88株;ENR的MPC90与MPC90/MIC90均最小,AM、CIP、OFL次之,说明这几种药物在临床选择耐药突变菌株的能力较小,GEN、NOR、SPE等药物的MPC90/MIC90较大,有较强的选择突变能力。测定24株菌株的突变频率,筛选出3株超突变子,PFGE分型表明,其带型与其他菌株差异显著。采用长片段PCR、Western-blotting、质粒互补实验对大肠杆菌野生型和超突变子的MMR重要组分MutS进行研究,超突变子mutS基因存在大片段缺失,MutS无表达,无活性,说明大肠杆菌超突变子发生的分子基础是其MMR系统重要组分MutS存在缺陷。耐药基因检测和膜蛋白分析表明,其耐药表型和基因型相符。进行滤膜接合试验表明,以超突变子为受体菌的转接合子的转化频率较高,接合在超突变子中容易发生,超突变子促进了耐药基因在不同菌株之间的转移。
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