硫酸软骨素镁的合成及其抗骨关节炎作用的研究

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研究目的:1.硫酸软骨素镁的合成及理化性质检测;2.探讨硫酸软骨素镁对于骨关节炎软骨的作用;3.初步探讨硫酸软骨素镁对于骨关节炎动物模型的修复效果。研究方法:1.离子交换树脂吸附钠离子后将镁离子与硫酸软骨素进行结合;2.SEM/EDS用于检测硫酸软骨素镁表面形貌和表面元素分布,ICP-MS用于检测硫酸软骨素镁的镁离子含量,FTIR对镁离子可能结合的官能团进行分析3.细胞增殖实验检测硫酸软骨素镁对OA软骨细胞增殖的影响,流式细胞学实验检测硫酸软骨素镁对OA软骨细胞凋亡的抑制作用,RT-qPCR检测转录层面上硫酸软骨素镁对OA软骨细胞的调控;4.C57小鼠行DMM手术构建OA动物模型,关节腔连续注射硫酸软骨素镁4周和6周后脱颈处死,取膝关节行Micro-CT检测及组织学染色。研究结果:1.我们成功地制备出硫酸软骨素镁,其中镁离子成功地取代了钠离子,并且均匀地分布在硫酸软骨素的表面;镁离子可以通过磺酸基及羧基结合到硫酸软骨素上;产物中镁离子的含量随氯化镁的量而增加;2.MgCS能促进骨关节炎(OA)软骨细胞的增殖,抑制凋亡。RT-qPCR分析表明,MgCS能显著增加OA软骨细胞的COLII表达,降低MMP9,IL-1β和iNOS的表达。此外,它能使OA软骨细胞凋亡相关基因p53表达下调和抑制凋亡基因Bcl-2表达上调;3.动物实验表明硫酸软骨素镁能增加OA小鼠模型的软骨厚度,并在关节炎早期抑制软骨下骨的破坏。结论:我们成功地合成并表征了新型的金属-多糖离子化合物MgCS,并通过体内外实验验证其具有一定的抗骨关节炎作用,未来有望成为骨关节炎治疗的新选择。
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