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本研究以糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)偭良、锡平1号、特抗650,肺形侧耳(P. pulmonarius)秀珍菇、黑侧五、新侧五,金顶侧耳(P. citrinopileatus)榆黄蘑和淡红侧耳(P. diamor)红平菇等8个平菇菌株为亲本,通过单孢杂交,获得杂交子代菌株,在此基础上对杂交菌株进行菌丝生长温度、子实体产量、木霉抗性、褐斑病抗性等一系列的筛选试验,旨在获得抗病性好、产量高的优良平菇新菌株。研究结果如下：1.收集获得平菇单核菌株309株,选择部分菌株进行单×单杂交,获得杂交组合864个,对杂交菌株进行镜检和拮抗试验,发现801个组合具有锁状联合,103个菌株与双亲具有明显拮抗线。进一步进行结实性试验,共获得77个出菇正常的杂交新菌株。通过复筛试验,筛选菌丝体生长速度快、长势强、菇形好,与母本有一定差别的杂交菌株27株。2.对亲本及筛选得到的杂交菌株进行RAPD分析,发现25个杂交菌株与亲本有显著的遗传差异,是杂交新菌株,有2个杂交菌株与亲本的遗传差异较小。3.温度试验表明,在25℃下杂交菌株P2、P3、P6、P8的生长速度较快,与亲本差异极显著；在30℃下菌株P6、P19、P20生长速度较快,其中P19生长速度分别比亲本提高了4.8mm/d和8.9mm/d,是所有菌株中长速最快的；而P2、P20、P23、P24、P25较耐高温。4.品比试验表明,10个杂交菌株子实体产量显著高于亲本,5个菌株子实体产量显著高于其亲本之一。其中,子实体产量最高的杂交菌株为P23和P30。5.木霉抗性试验表明,平板测试方法筛选出抗哈茨木霉(Trichoderma harzianum)T12较强的菌株3个,即P4、P7、P14；抗平菇木霉(T. Pleurotum夕T33较强的菌株5株,即菌株P10、P14、P16、P20、P21;袋栽试验方面,接种木霉后能全部正常出菇的菌株10株,包括亲本1株,在接种木霉下的出菇率为100%；产量损失率较低的有7个菌株。6.褐斑病平板拮抗试验,按抗性水平聚类分析可将测试菌株分为高抗品种,中抗品种、低抗品种和无抗性品种。其中高抗品种为P30、P4、P8、P32和亲本P40,抗性水平分别为70.07%、69.56%、67.82%、63.51%、61.57%；中抗品种15个,包括13个杂交菌株,2个亲本；低抗品种14个,包括9个杂交菌株和5个亲本；无抗性品种1个,为杂交菌株。袋栽试验采用人工接种托拉氏假单孢菌(Pseudomonas tolaasii)于子实体,统计病情指数,综合评价抗性水平的抗病性。平板抗性水平与人工接种病情指数之间有较好的相关性,抗性水平测定可作为快速筛选平菇抗细菌性褐斑病的方法之一。