葡萄果皮与果肉花色苷合成相关基因表达的组织特异性分析

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为探索葡萄果肉着色的分子机理,本文以烟73(果皮和果肉均有色)和玫瑰香(烟73的父本,仅果皮有色)为试材,用高效液相色谱-质谱联用(high-performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry,HPLC-MS)技术研究了两个品种果皮和果肉组织花色苷的积累模式,并用实时荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR,RT-PCR)的方法分析了两个品种果皮和果肉组织中18个与花色苷合成相关基因的表达。研究结果如下:(1)烟73果皮和果肉组织中均检测到18种花色苷,其种类相同但含量存在差异。烟73果皮中主要的花色苷是二甲基花翠素类,而其果肉在花后74 d之前和之后分别以二甲基花翠素类和甲基花青素类花色苷为主。在整个浆果发育期,烟73果皮中3’5’-羟基取代花色苷与酰基花色苷的比例均高于果肉。果皮与果肉中甲基花色苷的比例相差不大,且一直维持在较高水平。此外,烟73果皮和果肉中均检测到了天竺葵素-3-O-葡萄糖苷。(2)玫瑰香果肉(无色)中未检测到任何花色苷,果皮中仅检测到11种,且总花色苷的含量低于烟73的果皮和果肉,主要为甲基花青素类,其次是二甲基花翠素类。玫瑰香果皮中3’5’-取代花色苷与酰基花色苷的比例均低于烟73果皮,但甲基花色苷的比例与烟73果皮和果肉相差不大,且一直维持高的比例。另外,在玫瑰香的果皮中未检测到天竺葵素-3-O-葡萄糖苷。(3)烟73果肉中VvMYB5a、VvMYB5b、VvMYBPA1、VvMYCA、VvMYC1、VvF3’H和VvWDR1基因的表达量与玫瑰香果肉相差不大,而玫瑰香果肉中VvGST、VvOMT、VvAM3、VvCHS3、VvUFGT、VvMYBA1、VvF3’5’H、VvF3H1和LDOX基因的表达量远低于烟73果肉,尤其是烟73果肉中VvGST、VvOMT、VvAM3、VvCHS3和VvF3H1基因的表达量是玫瑰香果肉的50倍。因此,VvGST、VvOMT、VvAM3、VvCHS3、VvUFGT、VvMYBA1、VvF3’5’H、VvF3H1和VvLDOX基因可能是存在于烟73果肉中具有组织特异性表达的候选基因。(4)烟73果皮和果肉中酰基花色苷及3’5’-羟基取代花色苷的积累与VvGST、VvF3’5’H、Vv LDOX、VvMYBA1基因的表达呈显著的正相关,而总花色苷及甲基花色苷的积累与VvOMT、VvAM3的表达表现了显著的正相关性。因此,烟73果皮与果肉花色苷积累的差异很可能是由VvGST、VvF3’5’H、VvLDOX、VvMYBA1、VvOMT和VvAM3基因表达的差异所致。综上所述,烟73果肉中花色苷的积累可能是VvOMT、VvAM3、VvGST、VvF3’5’H、VvLDOX和VvMYBA1基因组织特异性表达的结果。
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