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微生物修复石油污染土壤和水体已经成为世界各国学者研究的热点之一，国外已经开发出可以降解石油的微生物菌剂产品，而国内关于固体石油降解菌剂的研制及应用大多处在实验室研究阶段。本论文对高效石油降解菌的筛选、鉴定，菌剂的制备工艺及菌剂在实验室条件下对石油污染的修复进行了初步探究，主要内容如下：（1）通过自然分离，从石油污染土壤中分离到2株优势细菌，分别命名为KF-2和KF-4，它们在实验室条件下培养8d后对石油的降解率分别达到38.6%和24.6%。经菌落和菌体形态观察、生理生化试验及16SrRNA基因序列分析，确定KF-2为木糖氧化产碱杆菌，KF-4为肺炎克雷伯氏菌。（2）以OD600值为参考指标，通过对KF-2和KF-4液体扩大培养条件的优化，确定它们液体培养的合适条件为：KF-2培养基最佳碳源为蔗糖（浓度9g/L），装液量40mL/250mL，种子培养12h后种子液以14%的接种量接入扩大培养基，扩大培养10h；KF-4培养基最佳碳源为蔗糖（浓度5g/L），装液量30mL/250mL，种子培养11h后种子液以8%的接种量接入扩大瓶，扩大培养4h。（3）以每克菌剂中的有效活菌数为主要指标，对KF-2和KF-4固体培养阶段的载体和其他条件进行优化。首先采用单因素试验对载体、料水比、加入水pH和扩培菌液的接种量进行研究，接着对固态培养温度和时间、烘干温度及载体的量进行正交试验设计。试验结果表明：KF-2和KF-4在菌剂制备时的最优载体皆为麦麸，最佳料水比皆为1:3.6；KF-2和KF-4加入水的最佳pH分别为9和6；KF-2扩培菌液的最佳接种量为25%，而KF-4的最佳接种量为20%；KF-2固态培养的最佳温度为25℃、培养时间3d、烘干温度30℃、载体的量为10g，KF-4固态培养的最佳温度为30℃、烘干温度30℃、载体的量10g、培养时间30h。优化后，KF-2和KF-4菌剂中的有效活菌数分别可以达到7.3×1010CFU/g和3.16×1010CFU/g。（4）对KF-2和KF-4两种固体石油降解菌剂进行扫描电镜观察和保存条件的研究，结果表明：麦麸是最佳的载体；4℃要比常温更适合菌剂的保存。（5）对KF-2和KF-4菌剂在石油污染水体和土壤中的模拟试验表明：不同的菌剂加量对模拟石油废水中石油的降解效果有一定影响，KF-2和KF-4菌剂的最适加量分别为0.4g和0.5g，降解率分别达到88%和67%；石油浓度为1g/L、2g/L、3g/L时，KF-2菌剂对石油的降解率变化显著，分别为73.3%，61.1%，21.4%，而KF-4菌剂对石油的降解率基本维持在66%；葡萄糖的添加可以在一定程度上促进KF-2菌剂对石油的降解。单一菌剂与混合菌剂的降油效果相比，KF-4菌剂的降油效果最好，为59%，可单独投加；生物表面活性剂（脂肽）的添加可以促进KF-4菌剂对石油的降解，最适添加浓度10mg/L，降解率67.6%。在模拟生物修复石油污染土壤的试验中，KF-2菌剂投加到含油2%和4%的土壤中20d后对石油都有一定的降解，分别为5.46%和8.29%，但效果不理想。