长链非编码RNA LINC01614对非小细胞肺癌生物学功能影响的实验研究

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aswe19
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背景:肺癌是常见的恶性肿瘤,主要分为小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer,SCLC)与非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC),其中又以非小细胞肺癌最为常见,由于早期诊断的困难和缺乏有效的治疗策略,肺癌的5年生存率仍然很低.长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC01614位于二号染色体长臂,目前该基因在非小细胞肺癌发生发展过程中起到的作用尚未明确.目的:1、检测非小细胞肺癌组织和非小细胞肺癌细胞株中LINC01614的表达水平.2、降低非小细胞肺癌细胞株中LINC01614的表达水平,探索该基因对非小细胞肺癌细胞株增殖、侵袭转移、凋亡等方面的影响.方法:1、为了探索LINC01614在非小细胞肺癌中的表达情况.在组织水平上,采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)方法对10例非小细胞肺癌组织及癌旁正常组织进行检测.在细胞水平上,采用qRT-PCR方法对人非小细胞肺癌细胞系A549及人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B进行检测.2、采用CRISPR-cas9技术,构建LINC01614-敲除A549细胞模型.3、CCK-8增殖实验检测敲除LINC01614后A549细胞株的增殖水平;划痕损伤实验研究敲除LINC01614后A549细胞株的转移能力;流式细胞术检测敲除LINC01614后A549细胞株凋亡的变化.结果:1、LINC01614在非小细胞肺癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织(p<0.05),差异具有统计学意义.2、LINC01614在人非小细胞肺癌细胞系A549中的表达水平显著高于人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B(p<0.05),差异具有统计学意义.3、CCK-8增殖实验结果显示与对照组相比,实验组细胞的增殖受到抑制(p<0.05),差异具有统计学意义.4、划痕损伤实验实验结果显示,与对照组相比,实验组细胞的迁移能力受到抑制(p<0.05),差异具有统计学意义.结论:1、LINC01614在非小细胞肺癌组织及非小细胞肺癌细胞系中均呈高表达.2、降低非小细胞肺癌细胞株中LINC01614的表达水平,可抑制细胞的增殖、迁移能力.
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