本研究通过采用放射性同位素标记、Cocktail探针药物结合现代色谱技术、以及分子生物学技术、酶活性分析等现代药理学方法，较系统地研究了rhTα1药物动力学特征和对主要药物代谢酶的影响。 第一部分rhTα1在大鼠体内的药动学研究。 目的：掌握大鼠皮下注射rhTα1的吸收、分布、排泄等药动学特征，为rhTα1的临床试验和给药方案设计提供参考。 方法：建立<'125>I同位素标记示踪和TCA沉淀蛋白相结合的方法，测定rhTα1单次给药后血药浓度．时间数据、计算药动学参数、生物利用度，测定血浆蛋白结合率、不同时间段组织药物含量，不同时间段尿、粪、胆汁的药物含量。 结果：(1)大鼠皮下注射rhTα1150、300和600μg/kg后，三个剂量的消除相半衰期(t<,1/2ke>)范围为5.33～6.47h，平均606h；平均清除率为0.05 L/kg/h；T<,peak>均值为1.0h；C<,max>为316.20、591.91、1302.92ng/mL；AUC<,0-24h)分别为2891.11、4584.26和12150.30h·ng/mL，C<,max>和AUC<,(0-24h)>均与剂量呈正相关。(2)大鼠皮下注射rhTα1的绝对生物利用度为94.9﹪。(3)rhTα1与血浆蛋白平均结合率为10.7﹪。(4)大鼠皮下注射rhTα1后，绝大多数组织含药量均于给药后1h达到最高，在以后时间内含药量逐渐下降。大部分时间点以肾脏含药量最高，脑组织含量最低。(5)大鼠皮下注射rhTα1后，在120h内有82.6﹪放射性从尿中回收，7.6﹪从粪中回收，提示该药主要经肾由尿排泄。 结论：大鼠皮下注射rhTα1后的药物消除符合一房室模型，呈线性动力学特征；表现出较快和良好的吸收，皮下注射rhTα1的绝对生物利用度较高，血浆蛋白结合率较低，在组织内广泛分布并能较快地消除，大部分时间以肾脏含药量最高，该药主要经肾由尿排泄。 第二部分rhTα1对大鼠肝微粒体细胞色素酶P450活性的影响。 目的：研究rhTα1对大鼠肝细胞色素P450酶活性的影响，以评价rhTα1对肝脏细胞色素P450是否有抑制或诱导效应，为指导临床合理联合用药提供实验依据。 方法：分别采用rhTα1体外与大鼠肝微粒体直接孵育，以及大鼠连续14天皮下注射rhTα1 150、300和600μg/kg，然后采用Cocktail探针法检测各组的CYP450活性。 结果：rhTα1体内连续给药14天后，对大鼠肝细胞色素P450同工酶(CYP1A2、CYP2D2、CYP2E1、CYP3A1、CYP2C6、CYP2C11)活性均具有不同程度的影响作用。对CYP1A2、CYP2D2、CYP3A1、CYP2C6、和CYP2C11的活性有剂量依赖性的增强作用，随着剂量的升高，这些CYP450酶亚型的活性也逐渐提高。600μg/Kg剂量对CYP2E1、2D2、3A1、1A2的活性具有显著增强作用，P<0.05～0.01：15～600μg/kg剂量对CYP1E1各剂量组均有显著诱导作用；对2C6、2C11的活性也有提高作用，但与空白对照组相比差异无统计学意义；rhTα1体外与微粒体直接温孵，对CYP1A2、CYP2D2、CYP3A1、CYP2C6、CYP2C11活性无明显影响，在20μmol/l、50μmol/l这两个高浓度下对CYP2E1可产生显著的抑制作用。 结论：rhTα1在150～600μg/kg剂量范围内连续给药14天，对CYP450同工酶的活性表现出不同程度的增强作用，说明rhTα1可通过药物代谢酶系统影响其他药物的代谢。 第三部分rhTal对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶基因和蛋白表达的影响。 目的：考察rhTal对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶基因和蛋白表达的影响，初步探讨rhTal影响CYP450酶活性的机制。 方法：大鼠连续14天皮下注射rhTα1 150、300和600μg/kg，取肝组织，制备肝微粒体和提取总RNA，分别应用反转录．聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫印迹杂交(Westernblot)法，检测CYP3A1、CYPlA2、CYP2E1几种亚型的mRNA和蛋白的表达。 结果：与空白对照组相比，rhTα1 CYP3A1、CYP1A2基因的rnRNA表达明显增加，CYP3A1、CYPlA2、CYP2E1几种亚型的蛋白表达明显增加。 结论： rhTα1在诱导CYP450酶活性的同时，相应同工酶的mRNA和蛋白表达水平也明显增加，提示rhTα1对CYP450有关亚型有整体的诱导作用。 第四部分rhTα1对大鼠肝、肾微粒体一氧化氮生成的影响。 目的：考察rhTα1对一氧化氮(NO)生成途径的影响，研究根据胸腺肽诱生细胞因子的机制，是否会影响rhTα1对CYP450酶的诱导作用结果。 方法：大鼠连续14天皮下注射rhTα1 150、300和600μg/kg，分别取肝、肾，制备肝微粒体和肾微粒体，分别测定大鼠肝、肾微粒体中NOS活性，以及NO生成量。 结果：rhTal连续给药14天，对肝、肾微粒体NOS活性以及NO生成量无明显影响，不同剂量组与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论：胸腺肽诱生细胞因子的机制，在本实验剂量下对NO生成途径没有影响，不会影响rhTα1对CYP450酶的诱导作用。 第五部分rhTα1对大鼠Ⅱ相代谢酶活性的影响。 目的：考察rhTα1对谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)、尿苷-5’-二磷酸葡糖醛酰转移酶(UGTs)这两个Ⅱ相代谢酶活性的影响。 方法：大鼠连续14天皮下注射rhTα1 150、300和600μg/kg，分别取肝、肾，制备肝微粒体和肾微粒体，分别测定大鼠肝。肾微粒体中GSTs、UGTs活性。 结果：与空白对照组比较，rhTα1在中、高剂量下对肝微粒体GSTs的抑制作用有显著意义(P<0.05～0.01)，对肾微粒体GSTs活性无显著影响(P>0.05)；rhTα1对肝脏GSTs的抑制作用，在治疗肝病、肿瘤等疾病时，对于逆转化学药物耐药性的产生，具有重要的临床价值和意义。rhTα1对大鼠肝UGTs活性无明显影响，对肾微粒体UGTs活性呈现出诱导作用，与空白对照组比较，高剂量下有显著差异(P<0.05)；rhTα1对肾微粒体UGTs表现出的活性诱导作用可能与其化疗保护、减轻药物毒性有关。 结论：rhTα1对肝、肾Ⅱ相代谢酶的活性有不同程度的影响，对GSTs、UGTs等Ⅱ相代谢酶的影响有一定的组织选择性，这可能与其对这些Ⅱ相代谢酶同工酶的选择性作用有关。