目的：肾小球硬化(Glomerulosclerosis,GS)系终末期肾病-肾衰竭的病理形态学表现，一般被认为是除了肾移植外不可治愈的疾病，细胞外基质和生长因子的过多积聚是导致其发生和进展的重要过程。本研究从肾脏病理、细胞因子网络和肾脏固有细胞的表型转化方面等探讨肾小球硬化的病理机制和疏利少阳标本兼治法之肾疏宁对阿霉素肾小球硬化大鼠的作用和作用机理。方法：采用单侧肾切除并阿霉素尾静脉注射的方法建立大鼠肾小球硬化模型，随机分为模型组、肾疏宁治疗组、苯那普利治疗组，另设假手术组为正常对照组。0、 4、 8周动态观察大鼠体重、24小时尿蛋白定量、血浆总蛋白、血浆白蛋白、血脂和肾功能的变化；8周末处死大鼠，光镜观察。肾脏形态学，电镜观察肾脏超微结构，采用免疫组化染色法测定肾组织细胞外基质成分Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)和转化生长因子β1(TGF-β1) 、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白含量；采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法测定纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1) 、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1) 、转化生长因子β1(TGF-β1) 、肝细胞生长因子(HGF)的基因表达。结果：1． 阿霉素肾小球硬化模型成功制作：实验8周末肾小球硬化模型组大鼠体重增长缓慢，尿蛋白排出增加，血浆总蛋白、血浆白蛋白降低，几乎所有脂质成分均明显升高，肾功能下降(P＜0． 01) ；肾组织细胞外基质成分ColⅣ、FN、LN大量积聚(P＜0． 01) 。病理形态学显示：光镜下肾小球系膜细胞、细胞外基质重度增生，约80％以上肾小球有节段性硬化，其中25～50％呈球性硬化；肾小管间质病变较重，小管上皮细胞肿胀、颗粒变性、坏死、脱落明显，小管扩张或萎缩，个别小管完全闭塞；肾小管间距加大，可见间质纤维化和大量炎细胞浸润。电镜下肾小球脏层上皮细胞足突广泛融合，细胞空泡样变，系膜细胞增生，基质增多，基底膜增厚不规则，部分区域可见大量胶原纤维；肾小管上皮细胞颗粒变性、坏死，线粒体肿胀或空泡变，偶见上皮细胞脱落入小管腔；间质成纤维细胞增生：提示肾小球硬化模型建立成功。2． 肾疏宁对肾小球硬化模型大鼠作用 中文摘要 肾疏宁和苯那普利均可显著降低肾小球硬化模型大鼠尿蛋白、血脂，保护肾功能，其中肾疏宁在实验整个过程中都可显著降低血胆固醇和血肌配，疗效较苯那普利明显持久(P<0.05);但肾疏宁和苯那普利对升高血清白蛋白(Alb)无明显作用，对血清总蛋白(TP)从数据上看较模型组有升高，但无统计学意义 (P>o.05)。病理形态观察显示肾疏宁对肾小球毛细血管裸开放程度、肾小球固有细胞、肾小管上皮细胞和肾间质都有明显的保护和修复作用;苯那普利对肾小球有明显的保护作用，对肾小管和间质修复作用不如肾疏宁。 免疫组化研究结果发现:在肾小球硬化大鼠的肾组织中，ColW主要分布于肾小球基底膜、毛细血管周围、系膜基质和硬化区，’肾小管的上皮细胞基底膜和肾间质纤维化区。FN主要分布于肾小球系膜基质、胞浆、基底膜，扩张的肾小管上皮细胞基底膜，肾间质纤维化区;LN主要分布于肾小球和肾小管上皮细胞基底膜和肾小球的系膜基质，间质未见表达。假手术组有ColW、FN、LN弱表达，模型组的ColW、FN、LN的染色较假手术组显著增强(P<0.01)，’肾疏宁和苯那普利治疗后ColW、FN、LN染色较模型组显著减弱(P<0.01)，’肾疏宁在上述各方面的疗效与苯那普利相似，对FN和ColW的抑制作用较苯那普利强(P<0.01，P<0 .05)。 TGF一p;主要分布于肾小球固有细胞胞浆、系膜基质和肾小管上皮细胞胞浆中，在肾小球硬化区表达明显;假手术组大鼠肾小球和小管间质有TGF一p;微弱表达，’肾小球硬化模型组可见TGF一pl大量分布于肾小球包曼氏囊、基底膜、’肾小球硬化区、血管内皮，‘肾小管上皮细胞胞浆和间质中，部分呈团块状。‘肾疏宁治疗组和苯那普利治疗组TGF一p，在肾小球和肾间质的分布较模型组明显减少，有极显著性差异(P<0.01)。 a一SMA主要分布于毛细血管周围、肾小球硬化区和球囊粘连处，部分肾小管上皮细胞胞浆中和肾间质纤维化区。假手术组大鼠肾组织可见毛细血管强表达，肾小球和肾小管没有。一SMA表达，间质中有少量Q一SMA表达，’肾小球硬化模型组大鼠可见Q一SMA分布在肾小球硬化区、球囊粘连处和部分肾小管上皮细胞，肾间质大量表达。’肾疏宁治疗组和苯那普利治疗组肾组织中Q一SMA蛋白表达较模型组显著减少(P<0.01)。 HPIAS一2000高清晰度彩色图文病理分析系统软件进行病理图像分析后，其半定量数据表明，肾疏宁治疗后能显著减少细胞外基质成分ColW、FN、LN在肾小球内的沉积，降低促硬化因子TGF一p，的含量，抑制Q一SMA的表达，从而抑制肾脏固有细胞表型转化，与模型组相比较有极显著性差异(P<0.01)。 中文摘要 逆转录聚合酶链?