阿月浑子酚类物质定性定量分析及其对细胞超微结构的影响

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本文以阿月浑子植株与外植体为材料,采用化学方法与色谱-质谱方法对阿月浑子中总酚以及酚类物质成分进行了定性和定量分析,并用透射电镜观察了外植体褐变的发生对细胞超微结构的影响。其内容包括阿月浑子总酚提取方法,不同组织中的总酚在生长过程中的动态变化;酚类物质的提取、鉴定;褐变发生时组织细胞超微结构的变化。主要结果如下:1、通过溶剂对比试验及单因素试验确定了从阿月浑子叶片中提取总酚的最佳提取溶剂及影响浸提率的相关因素,并通过正交实验优化了最佳提取工艺条件:利用80%的丙酮水,按1:50的料液比,在60℃下连续浸提两次,每次60min。2、应用阿月浑子总酚最佳的提取工艺条件对不同生长时期阿月浑子和黄连木不同品种的叶片、韧皮部、木质部中的总酚含量动态变化进行分析。阿月浑子与黄连木叶片总酚含量由高到低为:kerman>peters>新疆阿月浑子,中国黄连木>大西洋> UCB;韧皮部总酚含量为:新疆阿月浑子>kerman >peters;中国黄连木>UCB>大西洋;木质部总酚含量为:新疆阿月浑子>peters>kerman;UCB>中国黄连木>大西洋。在生长期内,阿月浑子各品种叶片中总酚含量平均值kerman为89.64mg/g,peters为86.76mg/g,新疆阿月浑子为58.59mg/g高于木质部中总酚含量的平均值kerman49.26mg/g,peters53.29mg/g,新疆阿月浑子65.02mg/g;同时黄连木各品种叶片中总酚含量的平均值中国黄连木为98.18mg/g,大西洋为96.51mg/g,UCB为95.38mg/g均高于木质部中总酚含量中国黄连木49.15mg/g,大西洋46.58mg/g, UCB55.28mg/g。3、采用不同方法提取阿月浑子叶片酚类物质,气相色谱-质谱法(GC-MS)对其进行定性与定量分析,阿月浑子叶片中含有邻苯二酚0.7640mg/g;邻苯三酚0.0580mg/g;没食子酸1.3024mg/g;儿茶素0.1040mg/g,香豆酸;确定了最佳的前处理方法。同时鉴定了阿月浑子半木质化茎段含有没食子酸0.4600mg/g和儿茶素0.1480mg/g;组织培养未发生褐变的苗中含有0.1300mg/g没食子酸和0.0036 mg/g儿茶素;褐变苗中含没食子酸为0.1184 mg/g;未发生褐变的愈伤组织中含2.0800 mg/g邻苯二酚,2.1720 mg/g邻苯三酚和2.9200 mg/g没食子酸;褐变的愈伤组织中含0.0180mg/g没食子酸。4、利用透射电镜(TEM)观察了阿月浑子褐变组织的细胞超微结构。阿月浑子褐变组织的细胞与未褐变组织细胞比较表明,细胞发生了质壁分离,具有膜结构的细胞器已消失,液泡也不存在。
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