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目的：本课题通过建立心肌梗死后慢性心衰大鼠模型，观察益气活血中药对慢性心衰大鼠心肌基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其抑制剂（TIMP-1）表达及左心功能的影响，采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、蛋白印迹、免疫组织化学多种方法，从基因、蛋白和组织形态学等方面，探讨益气活血中药治疗慢性心衰的作用机制和作用靶点。材料与方法：1.慢性心衰大鼠模型建立：选择体重为250～300克，普通级12周龄健康SD大鼠60只，适应性喂养一周后，随机抽取10只作为空白对照组，其余50只大鼠以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型，后经多普勒超声心动图检测左室射血分数（EF）≤60%，同时大鼠出现精神萎靡，毛色无光泽，说明造模成功。2.实验动物分组：大鼠在造模过程中共死亡8只，造模成功的24只大鼠随机分为3组，分别是模型组8只、中药组8只、西药组8只。空白对照组10只。3.实验给药：益气活血中药：由黄芪、人参、红花、丹参、益母草、三七粉、葶苈子等组成，由辽宁中医药大学附属医院药剂科根据2005年版国家药典规定选取药材，并负责煎煮。用药各组模型大鼠按人鼠剂量公式换算用药剂量，中药组9.2g生药/Kg/d；赖诺普利西药组，1.5mg生药/Kg/d。空白对照组和模型组大鼠给予常规等容积灌胃蒸馏水。连续给药6周。4.心功能测定：对大鼠灌喂药物（蒸馏水）6周后，后由电检科医生为大鼠做彩色超声多普勒心动图,测定各组大鼠心功能左室收缩末期内径（LVIDs）、左室舒张末期内径（LVIDd）、左室射血分数（EF%）EF%。5.采用实时荧光定量PCR技术测定各组大鼠心肌组织中MMP-1、TIMP-1基因表达水平。6.采用Western-blot法测定各组大鼠心肌组织中MMP-1、TIMP-1蛋白表达水平。7.常规HE染色，镜下观察各组大鼠心肌细胞的形态学变化。8．免疫组化方法检测各组大鼠心肌组织中MMP-1、TIMP-1的形态学变化。结果：1．慢性心衰动物模型组LVIDs、LVIDd明显增大，EF显著降低，与空白对照组比较，有显著的统计学差异（P＜0.01）；经药物干预后，各治疗组LVIDs、LVIDd明显缩小，EF明显增加。（1）对于LVIDs，中药组和西药组左室收缩末期内径（LVIDs）明显缩小，与模型组比较，有显著的统计学差异（P＜0.01）；中药组与西药组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。（2）对于LVIDd，中药组和西药组左室舒张末期内径（LVIDd）明显缩小，与模型组比较，有显著的统计学差异（P＜0.01）；中药组与西药组比较，有统计学差异（P＜0.05）。（3）对于EF%，中药组和西药组左室射血分数（EF%）明显增加，与模型组比较，有显著的统计学差异（P＜0.01），中药组与西药组比较，无统计学意义（P＞0.05）。2.慢性心衰动物模型组MMP-1mRNA表达明显升高，与空白对照组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；经药物干预后各治疗组MMP-1mRNA明显下降，与模型组相比，均有显著统计学意义(P＜0.01）；其中中药组下降最为明显，是模型组的0.53倍(P＜0.01），西药组是模型组的0.58倍(P＜0.01），中药组与西药组相比，无统计学意义（P＞0.05）。3.慢性心衰动物模型组MMP-1蛋白表达明显升高，与空白对照组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；经药物干预后各治疗组MMP-1蛋白表达明显下降，与模型组相比，均有显著统计学意义(P＜0.01）；其西药组下降最为明显，是模型组的0.46倍(P＜0.01），中药组是模型组的0.50倍(P＜0.01），西药组与中药组比较，有统计学意义（P＜0.05）。4.慢性心衰模型组Timp-1mRNA表达明显降低，与空白对照组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；经药物干预后各治疗组Timp-1mRNA明显升高，与模型组相比，均有显著统计学意义(P＜0.01）；其中药组升高最为明显，是模型组的2.50倍(P＜0.01），西药组是模型组的2.05倍(P＜0.01），西药组与中药组比较，有统计学意义（P＜0.05）。5.慢性心衰模型组Timp-1蛋白表达明显降低，与空白对照组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；经药物干预后各治疗组Timp-1蛋白表达明显升高，与模型组相比，均有显著统计学意义(P＜0.01）；其中药组升高最为明显，是模型组的2.09倍(P＜0.01），西药组是模型组的1.93倍(P＜0.01），中药组与西药组相比，有统计学意义（P＜0.05）。6. HE染色在光镜下观察结果，空白对照组心肌细胞排列规整，横纹清晰，心肌细胞核位于心肌细胞边缘，其形态、大小正常，肌原纤维排列有序，无断裂、缺损及空白区。模型组：心肌细胞交织成网，看不到横纹，肌原纤维排列紊乱、断裂甚至缺失，心肌细胞核固缩，出现空白区，异染色质呈现团块状，相邻细胞闰盘间隙增宽，紧密连接及粒粒连接消失。各治疗组心肌细胞形态与模型组比较均有所改善，西药组改善最明显。7.利用免疫组化法分析，慢性心衰模型组MMP-1，平均灰度值：550.14±132.83，与空白对照组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；西药组效果最为明显：114.72±46.26，与模型组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；中药组：124.98±30.40，与模型组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；西药组与中药组相比，无统计学意义（P＞0.05）。8.利用免疫组化法分析，慢性心衰模型组Timp-1，平均灰度值：115.83±43.25，与空白对照组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；西药组：181.16±55.34，与模型组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；中药组：172.94±48.75，与模型组比较，有显著统计学意义(P＜0.01）；中药组与西药组相比，无统计学意义（P＞0.05）。结论：1.益气活血中药干预6周后，益气活中药方可通过增大心衰大鼠的LVIDs、LVIDd，明显增加EF，改善慢性心衰大鼠心脏功能，抑制心腔扩大。2.利用PCR、Western blot、免疫组化等方法检测大鼠心肌组织MMP-1及TIMP-1基因和蛋白表达，发现益气活血中药可抑制心肌组织中MMP-1蛋白及基因表达，上调TIMP-1蛋白及基因表达，降低MMP-1/TIMP-1的比率，阻止MMP-1对心肌胶原的降解，协调ECM降解与合成，可延缓或逆转心室重构，改善心肌顺应性，增加心肌收缩力，起到治疗慢性心衰的作用。3.慢性心衰大鼠心肌组织中MMP-1蛋白及基因表达的增加、TIMP-1蛋白及基因表达的下降及MMP-1/TIMP-1比例失衡共同参与了左室重构的过程。4.益气活血中药具有益气活血、利水消肿之功效，能够改善心功能，抑制心室重构，其疗效西药赖诺普利组，为慢性心衰的中医药治疗提供科学依据和有效方法。