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个体AMH的水平与其卵巢储备能力直接相关,AMH水平越高的个体,卵巢储备能力越强。现已证实,AMH水平可以作为评价一些物种卵巢储备能力的标准。关于AMH的表达调控关系,国内外研究已证实,BMPs家族可以通过SMAD通路对AMH的表达起调控作用,且已有文献报道,BMP15可以上调人和绵羊卵巢中AMH的表达。但关于BMP15调控AMH的具体机制尚不清楚。为了研究BMP15调控AMH表达的机制,本实验以性成熟期的重庆本地山羊为采样对象,采集其两侧卵巢,收集颗粒细胞进行培养。先用不同浓度的外源人重组BMP15蛋白对颗粒细胞进行处理,通过测定处理后颗粒细胞中AMH的表达量变化和p38 MAPK通路的磷酸化情况,确定了10 ng/mL的BMP15对AMH的表达具有上调作用,且对p38 MAPK的磷酸化具有激活作用。在此基础上,采用p38 MAPK通路的抑制剂SB203580和p38 MAPK基因的干扰片段与10 ng/m L的BMP15同时作用于颗粒细胞,测定颗粒细胞中AMH和AMH转录相关因子SOX9的基因和蛋白表达量,根据各因子表达量的变化情况确定p38 MAPK通路在该过程所起的作用。研究结果如下:1、BMP15蛋白可以上调山羊卵巢的颗粒细胞中AMH的表达,且浓度越大,其对AMH的上调作用越强;同时,浓度为10 ng/m L的BMP15的刺激可以激活p38 MAPK通路的磷酸化。2、抑制剂浓度在25μM以下时,不会对颗粒细胞的活性产生影响,且当抑制剂浓度为20μM时对通路的抑制效果最佳。同时加入BMP15和p38 MAPK通路抑制剂后,p38 MAPK通路被有效抑制,此时从基因和蛋白水平检测AMH和SOX9的表达量相对于只加入BMP15的实验组都显著降低(P<0.05),说明p38 MAPK通路的阻断影响了BMP15对AMH和SOX9的上调作用。3、采用干扰片段对p38 MAPK基因的沉默显著降低了p38 MAPK基因的表达量,先对p38 MAPK基因沉默后再加入BMP15蛋白,相对只加入BMP15蛋白的实验组,AMH和SOX9的表达也在基因和蛋白水平显著降低了(P<0.05),进一步证明了p38 MAPK通路在该过程中起着重要作用。综合以上结果得出结论,浓度为10 ng/m L的BMP15可以上调AMH的表达,这一作用主要通过激活p38 MAPK通路实现,SOX9参与了该过程。本研究为AMH的相关研究提供了基础数据,也为明确AMH的调控的相关分子机理打下了坚实的基础。