ADSCs移植治疗DSS诱导的炎症性肠病模型及人参皂苷Rg1的协同作用

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目的探讨人脂肪间充质干细胞(ADSCs)联合中药人参单体人参皂苷Rg1治疗DSS诱导的炎症性肠病模型的作用机制,为ADSCs联合人参皂苷Rg1治疗炎症性肠病的深入研究提供实验依据。内容与方法根据随机对照原则,实验选取8周龄的雄性C57BL/6小鼠75只用于分组治疗观察,分别为正常对照组、DSS组、Rg1组、ADSCs组、ADSCs+Rg1组5组,各组15只,除正常对照组外,各组予3%DSS溶液自由饮用7天,第8天改为正常饮水。在实验造模阶段,Rg1组和ADSCs+Rg1组于造模开始时即以人参皂苷Rg1 20mg/kg[115]灌胃,其余组分别予以生理盐水灌胃,至实验结束,ADSCs组和ADSCs+Rg1组于造模的第4天、第7天尾静脉注射ADSCs(1×106/只[110]),余各组予生理盐水尾静脉注射。所有组别小鼠于造模开始后第14天处死。观察并记录五组小鼠的体重、大便黏稠度、肠道出血情况;运用结肠组织HE染色技术,观测远端结肠组织病理形态学变化;运用流式细胞术检测小鼠淋巴细胞Treg、Th17细胞在脾脏中的水平变化;ELISA法检测各组小鼠血清炎症因子IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α 表达。结果1.造模成功后,与control组相比,DSS组体重下降明显,干预后,与DSS组相比,Rg1组、ADSCs组及联合用药组小鼠体重明显上升,且ADSCs+Rg1组体重上升较ADSCs明显(P<0.05);2.与control组相比,DSS组小鼠结肠挛缩明显,经ADSCs和Rg1治疗后小鼠结肠长度明显增加(P<0.05);3.DSS组结肠病理切片显示肠黏膜破坏严重,炎症细胞浸润明显,炎症评分明显增加,与DSS组相比,Rg1组、ADSCs组及联合用药组小鼠结肠黏膜得以修复,炎症细胞浸润减少,炎症评分下降(P<0.05);4.小鼠血清TNF-α、IL-6、IL-17A水平在所有治疗组中明显低于DSS组,其中联合用药降低的最明显,ADSCs组较Rg1组降低更为明显(P<0.05),IL-10水平在所有治疗组中明显高于DSS组,其中联合用药增高最为明显(P<0.05),ADSCs组较Rg1组增高明显,但无统计学差异(P>0.05);5.流式细胞术检测脾脏中Treg细胞,各治疗组Treg细胞明显高于DSS组,Rg1组增高更为明显,具有统计学差异(P<0.05);其中联合用药组与Control组比较无明显统计学差异(P>0.05);6.流式细胞术检测脾脏中Th17细胞,经ADSCs及Rg1治疗后Th17细胞较DSS组明显降低,其中联合用药降低更为明显,具有统计学差异(P<0.05),联合用药组与Control组对比无明显统计学差异(P>0.05)。结论ADSCs和人参皂苷Rg1可能是通过调节DSS诱导的炎症性肠病模型小鼠Treg及Th17细胞免疫平衡及缓解炎症反应来达到治疗炎症性肠病的作用。
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