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【目的】研究四株不同转移潜能人肝癌细胞株中细胞外基质蛋白-1(extracellularmatrix protein1,ECM1)表达情况,分析ECM1表达与肝癌细胞侵袭转移潜能的关系。应用基因重组技术构建ECM1真核表达载体,转染增强ECM1在人肝癌细胞SMMC-7721中的表达,分析其对人肝癌细胞SMMC-7721生物学功能的影响和对脐静脉内皮细胞(HUVEC)的体外增殖、血管形成能力的影响。【方法】应用RT-PCR、Western Blot和细胞免疫化学染色技术方法,检测四株不同转移潜能的人肝癌细胞株中ECM1的表达水平。根据GenBank数据库提供的ECM1的基因序列(NM004425)构建ECM1的真核表达载体pEGFP-N2-ECM1,经测序鉴定后,在脂质体介导下转染人肝癌细胞SMMC-7721,以750μg/m1的G418筛选3周获得阳性克隆细胞,挑取扩大培养,通过荧光显微镜、RT-PCR及细胞免疫化学染色技术鉴定筛选后扩大培养的阳性细胞。基质(Matrigel)粘附实验检测ECM1对SMMC-7721细胞粘附能力的影响;Transwell体外侵袭和趋化运动实验观察转染后细胞侵袭和运动能力的变化。MTT法检测ECM1表达对SMMC-7721和HUVEC细胞增殖能力的影响;基质血管形成实验检测ECM1对HUVEC体外血管形成能力的影响。【结果】四株不同转移潜能的人肝癌细胞株中ECM1表达量存在明显差异,随着细胞株转移潜能的逐步增加,ECM1表达量呈升高趋势;其中转移潜能最高的肝癌细胞HCC-LM3细胞ECM1的表达量最高,低转移潜能的SMMC-7721细胞表达量最低和正常肝细胞L-02ECM1的表达量相似。成功构建了ECM1的真核表达载体pEGFP-N2-ECM1并经PCR鉴定、酶切鉴定及测序鉴定基因序列正确;转染SMMC-7721经G418筛选3周后得到抗性克隆;荧光显微镜下观察细胞内荧光物质布满整个细胞;RT-PCR验证结果显示ECM1转染组细胞中ECM1的表达明显高于空质粒对照组及未转染组;细胞免疫化学染色结果显示转染后的ECM1蛋白在细胞质表达,与对照组及未转染组有显著差异。转染ECM1后SMMC-7721细胞形态无明显变化,仍为上皮样形态;ECM1对SMMC-7721细胞粘附性、体外侵袭运动能力及体外增殖能力无明显影响;转染ECM1的SMMC-7721上清培养液能促进脐静脉内皮细胞的增殖和体外血管形成的能力,与对照组及未转染组对比有显著差异。【结论】 ECM1在肝癌细胞中表达,其表达水平与肝癌细胞的侵袭潜能呈正相关;ECM1对肝癌细胞SMMC-7721的形态、粘附、侵袭运动及增殖能力无明显影响但能促进脐静脉内皮细胞的增殖和体外血管形成的能力,提示可能通过促进肝癌血管生成从而促进肝癌细胞生长转移。