紫苏离体再生体系的建立及其遗传转化初步研究

来源 :中北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Willy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究以紫苏的子叶和下胚轴为外植体进行组织培养,建立了紫苏的离体再生体系,获得了正常的再生植株。本实验运用对比试验的方法,研究了影响紫苏再生的因素,同时对紫苏的遗传转化体系进行了初步探索。其实验结果表明:1、紫苏子叶的最佳分化培养基为MS+BA 1.0mg/L+IAA 1.5 mg/L,再生率最高80.0%,平均每外植体长芽2.3个,下胚轴的最佳分化培养基为MS+BA 3.0mg/L+NAA 0.3 mg/L,再生率为70.9%,平均每外植体长芽2.5个。再生芽的生根培养基为1/2MS+1.0mg/L BA+0.3mg/L IAA,生根率达到100%,移栽成活率在85%以上。2、以11天苗龄的紫苏苗作为实验材料,白砂糖添加30g/L,2,4-D预培养后转入最佳分化培养基,子叶暗培养12天,下胚轴暗培养8天后,给予每天14h光照处理,可以较大幅度提高紫苏外植体的再生率。培养基中添加4mg/L AgNO3的处理可使子叶外植体再生频率提高5.4%,下胚轴外植体的再生频率提高9.4%。3、遗传转化研究表明,下胚轴抗性芽的筛选压力为40mg/L Kan,转化苗生根的筛选压力为35 mg/L Kan,研究发现培养基中添加15 mg/L Kan时,每外植体长芽7.6个,为对照组的3.3倍,较大地提高了每个外植体的再生芽数。农杆菌侵染后,选用羧苄青霉素作为抑菌剂,将外植体与农杆菌共培养2天,转接到附加羧苄青霉素400mg/L的培养基上进行抑菌处理,抑菌效果效果最好。
其他文献
首先通过两步法合成离子液体,然后以其为反应介质,结合传统水热反应、微波反应、超声波反应,制备了含氧族元素的纳米粉体,并探讨了离子液体在反应中的作用机理。   两步法
本实验以转基因技术为基础,利用花粉管通道法将抗逆相关基因MvP5CS和MvNHX1转化到棉花中,在T1、T2、T3中代通过卡那霉素筛选抗性植株,并结合分子检测鉴定阳性转基因植株,将其进行扩繁,对转基因棉花植株进行DNA水平、生理生化水平和RNA水平的检测分析,研究MvP5CS和MvNHX1在棉花中的整合和表达情况,并以非转基因棉花为对照,综合分析转基因棉花的抗旱性。主要结论如下:1、选取健康的棉花