维生素C对生长中期草鱼生产性能、肠道、机体和鳃健康以及肉质的作用及其作用机制

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本文旨在研究维生素C(VC)对生长中期草鱼生产性能,肠道、机体和鳃健康以及肉质的作用及作用机制。试验选取体重为264.37±0.66 g的中期草鱼540尾,均分为6个处理,分别饲喂不同水平VC的饲粮(2.9、44.2、89.1、133.8、179.4和224.5 mg VC/kg饲粮)10周,考察VC对中期草鱼生产性能和肉质的影响。10周生长试验结束后,每个处理选30尾接近处理均重的鱼均分为两组,分别进行14天的嗜水气单胞菌攻毒试验和3天的柱状黄杆菌攻毒试验,研究VC对鱼类肠道、机体和鳃健康的作用及作用机制。生长试验研究发现:适宜水平的VC (89.1 mg/kg)提高了中期草鱼特异生长率增重百分比、采食量和饲料效率(P<0.05),提高了生产性能。同时,适宜水平的VC还提高了中期草鱼肌肉营养物质(蛋白、脂肪、必需氨基酸、风味氨基酸和多不饱和脂肪酸)含量、pH、剪切力和羟脯氨酸含量(P<0.05),降低了蒸煮损失、乳酸含量、组织蛋白酶B和L活力以及饱和脂肪酸含量(P<0.05),提高了肌肉品质;肌肉品质的提高可能与VC通过上调核因子相关因2 (Nrf2)基因表达及下调锚定蛋白la (Keapla)和Keaplb基因表达(P<0.05),提高了铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)等抗氧化酶的基因表达和活力(P<0.05),从而降低了ROS含量(P<0.05),降低了氧化损伤有关。攻毒试验研究发现:适宜水平的VC (133.8 mg/kg)提高了抗病力(肠炎、赤皮和烂鳃)(P<0.05),抗病力的提高与提高了肠道、机体和鳃健康有关,这与其提高了肠道、头肾、脾脏、皮肤和鳃的溶菌酶和酸性磷酸酶(皮肤除外)活力、补体C3和C4含量(P<0.05),上调了抗菌肽的基因表达(P<0.05),提高了抗菌能力;同时,可能通过下调核转录因子κBp6(NF-κBp65)和雷帕霉素靶蛋白信号(P<0.05)(P<0.05),下调了主要促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(前肠和鳃除外)、干扰素γ2、白介素1p(肠道除外)和IL-8基因表达(P<0.05),上调了主要抗炎细胞因子IL-10和转化生长因子β1(TGF-β1)(皮肤除外)基因表达(P<0.05),降低了炎症反应,提高了免疫能力有关。进一步研究发现,肠道、机体和鳃健康的提高与VC维持了肠道、头肾、脾脏、皮肤和鳃结构完整性有关:(1)适宜水平的VC可能通过Nrf2信号上调了CuZnSOD等抗氧化酶的基因表达并提高了酶活力(P<0.05),提高了非酶抗氧化物质还原型谷胱甘肽和VC含量(P<0.05),提高了自由基清除能力,降低了氧化损伤;同时,可能通过下调半胱天冬酶-3 (caspase-3)、caspase-8和caspase-9基因表达(P<0.05),抑制了细胞凋亡,维持了细胞结构完整性;(2)VC可能通过下调肌球蛋白轻链激酶(MLCK)(脾脏除外)基因表达(P<0.05),上调了细胞间ZO-1、ZO-2和Claudin-b(鳃除外)等屏障功能蛋白基因表达(P<0.05),下调了头肾和脾脏孔状疏松蛋白Claudin-12/-15基因表达(P<0.05),维持了细胞间结构完整性。综上所述,VC能够提高中期草鱼的生产性能、肌肉品质和抗病力。肌肉品质的提高可能与VC通过Nrf2信号上调了CuZnSOD等抗氧化酶基因表达和活力从而降低了氧化损伤有关。抗病力的提高与VC提高了草鱼肠道、机体和鳃健康有关:(1)适宜水平的VC提高了草鱼肠道、头肾、脾脏和鳃抗菌物质活力、含量和基因表达,提高了抗菌能力,并通过上调主要抗炎细胞因子,下调主要促炎细胞因子及相关信号分子NF-κB p65等的基因表达降低了炎症反应,提高了鱼类免疫能力;(2)VC可能通过Nrf2信号上调了CuZnSOD等抗氧化酶基因表达和活力从而降低了氧化损伤,并通过下调caspase-3等促凋亡蛋白基因表达抑制了细胞凋亡,维持了细胞结构完整性;同时,可能通过调控MLCK信号调控了细胞间紧密连接蛋白基因表达,维持了细胞间结构完整性。以PWG和抗病力(肠炎、赤皮和烂鳃)为标识确定中期草鱼(264-1031g)VC的需要量分别为92.8、124.0、122.9和127.0 mg/kg饲粮。
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