积雪草挥发油气相指纹图谱研究

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目的:采用气相色谱法对积雪草挥发油化学成分指纹图谱进行研究,建立积雪草挥发油的气相指纹图谱标准,用于积雪草药材挥发油的质量控制,并为雪抑乐质量标准的制订提供依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取积雪草挥发油。利用气相色谱法测定积雪草挥发油指纹图谱,通过考察不同条件下的分离效果,优选色谱条件:色谱柱的选择,柱温或程序升温模式,载气流速,进样量;考察供试品溶剂对测定的干扰;并进一步考察指纹图谱的稳定性、精密度、重现性,最终确定积雪草指纹图谱分析的气相色谱条件。按所确定的色谱条件和测定方法,对积雪草所含挥发油成分的气相色谱指纹图谱进行研究。先后对10批积雪草药材供试品进行GC检测分析,以石竹烯为参照物,按“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求”计算相对保留时间及峰面积比值,标定共有指纹峰,并对10批药材进行相似度比较。结果:优选出的色谱条件为:色谱柱:HP-5Ms石英毛细管柱(30m×0.25mm);柱温:初温90℃(保持5min)以10℃/min升至170℃(保持8min)以5℃/min升至250℃(保持2min);载气:高纯氮气,流量1.2ml/min(0.12Mpa);补充气:氮气,流量40ml/min;分流比:1:10;燃烧气:氢气,流量40ml/min;助燃气;空气,流量500ml/min;检测器:氢火焰离子化检测器(FID),检测器温度270℃,气化室温度235℃;进样量:1ul。供试品溶剂以选择石油醚(30~60℃)对测定无干扰。方法学考察结果:精密度试验共有峰的相对保留时间、相对峰面积的RSD为0~2.78%,重现性试验共有峰相对峰面积、相对保留时间的RSD为0.02%~2.81%,供试品在8小时之内检测稳定,共有峰的相对保留时间、相对峰面积的RSD为0.01%~2.80%。对10批积雪草药材供试品进行GC检测分析,积雪草GC指纹图谱中共有32个共有峰,共有峰峰面积总百分含量为91.62±9.12。10批药材的GC指纹图谱相似度分别为0.904~0.965。结论:本研究所建立的GC分析方法可使积雪草挥发油中各组分达到较好分离效果,精密度、重现性、稳定性良好。10批药材的GC指纹图谱相似性高,所建立的GC指纹图谱标准符合国家指纹图谱技术要求,可用于积雪草药材挥发油的质量控制,并为雪抑乐质量标准的制订提供依据。
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