西妥昔单抗对人鼻咽癌细胞株CNE的作用

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鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的头部和颈部肿瘤的高发地带为我国及亚洲,世界上大多数国家,0至1/100000的发生率,但在我国的发病率高达10~30/万,南部地区更甚。目前的流行病学研究表明,遗传、环境、病毒发病机理仍然是致病三要素。从治疗,由于其解剖部位特殊,根治手术困难,低分化鳞状细胞癌的组织学类型多见,因此放射治疗是主要的治疗方法。方法:观察西妥昔单抗影响在人类鼻咽癌细胞株细胞凋亡,并探讨其可能的机制。方法:利用MTT法测定西妥昔单抗20-30%抑制鼻咽癌细胞株的浓度;药物浓度在CNE细胞作用机制,,透射电子显微镜、Hochest33258染色荧光染色法观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹检测Bax、Bcl-2蛋白表达。而对照组、单独放疗组、热放疗组、靶细胞放疗组以及热放疗以及靶细胞放疗组, Hochest33258染色荧光法观察每组鼻咽癌细胞株的凋亡形态学改变;检测流式细胞凋亡率;免疫印迹检测Bax的表达,Bcl-2蛋白质的表达。结果:第一部分:鼻咽癌细胞株对西妥昔单抗浓度(IC20~30)是10μg/毫升;鼻咽癌细胞西妥昔单抗治疗后,在电子显微镜下观察,荧光显微镜出现典型的凋亡形态学和超微结构变化;流式细胞术显示24小时、48小时凋亡率分别为14.30±0.78%,15.30±0.95%,显著提高(P <0.05);免疫印迹分析显示Bax蛋白表达为上调,Bcl-2蛋白质呈下调趋势, Bax蛋白/Bcl-2比率呈增加趋势。结论:西妥昔单抗对人类鼻咽癌细胞株CNE显著诱导细胞凋亡,这可能与Bax蛋白/Bcl-2比率增加促进细胞凋亡。第二部分:荧光染色法观察CNE细胞典型的凋亡形态学变化,以热放疗以及靶细胞热放疗组更重要;流式凋亡检测的目标是显示在靶细胞热放疗组明显高于对照组的细胞凋亡率和相应单放疗组、热放疗组、靶细胞放疗组(P <0.05);免疫印迹分析表明,每个治疗组与对照组相比提高了Bax蛋白/Bcl-2比率的目标群体最重要的以靶细胞热放疗组明显(P <0.05)。结论:西妥昔单抗结合放疗和高热低细胞凋亡率显著增加CNE细胞,这可能与Bax蛋白/Bcl-2比率进一步促进凋亡增加。
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