【摘 要】
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地衣芽孢杆菌是一种公认安全(GRAS)的微生物,其产生的酶制剂已广泛用于食品工业生产中.该工作以地衣孢杆菌(Bacilluslicheniformis)AS10106为出发菌株,通过对不同培养基中α-
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地衣芽孢杆菌是一种公认安全(GRAS)的微生物,其产生的酶制剂已广泛用于食品工业生产中.该工作以地衣孢杆菌(Bacilluslicheniformis)AS10106为出发菌株,通过对不同培养基中α-乙酰乳酸脱羧酶表达量的比较,选择了无机氮源培养基BCM作为最适产酶培养基.将培养的地衣芽孢杆菌制备无细胞粗酶液,经硫酸铵沉淀,PEG6000沉淀,DEAE-SepharoseFastFlow柱层析,Gigapite-K-100S柱层析和Sephadex-G-100柱层析分离纯化后,其酶蛋白经垂直板状SDS-PAGE电泳为一条带,证明得到地衣芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶电泳纯.酶的纯化倍数约为53.5倍,得率为1.3﹪,纯酶的比活为323.14u/mg.该文通过对地衣芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶纯化,确定其单体分子量为32Kda,结合其基因序列测定结果,确定了其开放阅读框架(ORF).为进一步将地衣芽孢杆菌的α-乙酰乳酸脱羧酶基因整合到啤酒酵终染色体中,构建缩短发酵周期的啤酒酵母工程菌株奠定基础.
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