急性髓系白血病细胞体外衍生的树突状细胞诱导抗自身白血病特异性T细胞反应

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:l1113106a1
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目的: 体外研究3种不同的细胞因子组合诱导各型急性髓系白血病(AML)细胞分化为树突状细胞(DC)的可行性、AML细胞衍生的DC(AML-DC)的生物学特性以及AML-DC是否可诱导自体T细胞产生抗自身白血病特异性的细胞毒性反应。 方法: 去T细胞的AML骨髓或外周血单个核细胞分别在含细胞因子组合GM-CSF+IL-4、GM-CSF+TNF-α或GM-CSF+IL-4+TNF-α以及不含细胞因子的培养液中培养7~14天。在相差显微镜下动态观察培养AML细胞的形态和活力。还用台盼蓝拒染法确定细胞活力以及培养AML细胞离心涂片细胞化学染色观察细胞形态。间接或直接免疫荧光染色鉴定培养前后AML细胞的免疫表型。标准5天单向混合白细胞培养(MLC)检测培养前后AML细胞的同种异体刺激能力。异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-DX)摄入试验检测AML-DC的液相大分子吞噬功能。培养前后AML细胞与经抗CD3抗体激活过的自体T细胞在低浓度IL-2条件下共培养7天,以产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。自体T细胞取自AML患者疾病初发或完全缓解时的骨髓或外周血。间接免疫荧光法检测培养前、单用IL-2以及培养前后AML细胞刺激的T细胞的免疫表型。乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定T细胞的溶细胞活性。筑巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光原位杂交(FISH)检测培养前后AML细胞的特异融合基因。 结果: 21例各型AML细胞在GM-CSF+IL-4、GM-CSF+TNF-α或GM-CSF+IL-4+TNF-α作用下均发生典型的DC形态变化。上述3
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