耐冷细菌的筛选及对畜禽废水处理效果研究

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从若尔盖高原湿地采集沼泽土,驯化后从采自花湖及阿西牧场的土样中分离获得了22株对畜禽废水有机物具有降解能力的耐冷细菌,对分离的耐冷细菌采用16S rDNAPCR-RFLP分析,选出遗传差异较大的14株耐冷菌。对供试菌株6℃时的生长代时、对畜禽废水CODcr去除能力、表型多样性进行了测定。同时,对5个代表菌株进行16S rDNA全序列的测定,以确定筛选出的对畜禽废水处理能力较高的耐冷菌株的种属。结果如下:筛选获得的遗传差异较大的14株供试菌株的代时介于4.9h~11.6h之间,试验选取了生长代时在4.9 h-6.5 h的9株耐冷细菌(NLJ1,NLJ10,NLJ11,NLJ14,NLJ15,NLJ17,NLJ18,NLJ19和NLJ22)用于畜禽废水处理。在6℃~9℃和22℃~25℃条件下,单个菌株对畜禽废水CODcr去除率存在差异,其中,6株耐冷细菌NLJ10,NLJ11,NLJ14,NLJ15,NLJ17和NLJ19在两种温度下的CODcr去除率均约为63%~75%,其余菌株的CODcr去除率小于50%。用这6个菌株混合接种处理灭菌畜禽废水6 h,两种温度下其CODcr去除率分别达85.42%和88.81%。实验室条件下,将采自雅安、都江堰和成都等地污水处理厂的活性污泥混合接种上述6株耐冷细菌后处理畜禽废水6 h,其CODcr平均去除率分别为81.67%,76.32%和70.56%;方差分析表明,不同处理间CODcr去除率无显著差异,说明这6株耐冷细菌对活性污泥的适应性较好。实际条件下,将上述6株耐冷细菌接种于CASS反应池,测定了CODcr、NH4+-N、TN、TP的去除率,结果表明,耐冷菌株对畜禽废水的CODcr和TN的去除率均为未接菌反应池的5倍左右,降解效果显著。对6株耐冷细菌表型性状进行了测定,结果表明:6株细菌是典型的耐冷菌,大约在4℃~28℃生长,这些菌株能利用蔗糖,半乳糖,D-甘露糖,D-木糖,50%的菌株能利用葡萄糖,只有NLJ14能利用果糖和麦芽糖;50%的菌株能耐受4%的NaCl。但在碳源利用、对不同酸碱度的适应、淀粉水解、明胶液化等方面有较大差异。对分离的22株耐冷细菌16S rDNA PCR-RFLP结果表明,22株耐冷细菌形成了8种遗传类型。对代表菌株进行16S rDNA全序列的测定结果表明,5株耐冷菌代表菌株分布于4个系统发育分支上,即Pseudomonas sp、Sphingobacterium sp、Mycoplana sp和Arthrobactersp,表现出了较丰富的多样性。
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