蛹虫草固体栽培及下脚料深加工工艺研究

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本研究课题深入而系统地研究了蛹虫草固体栽培技术和蛹虫草栽培下脚料中虫草多糖和虫草素的提取纯化工艺、检测方法、结构鉴定以及虫草多糖和虫草素综合提取的工艺路线,得到了满意的结果。1、蛹虫草固体栽培需从优良菌种的选择、培养料的科学配制以及栽培的精心管理等几个环节加以注意,方可获得优质、高产。2、蛹虫草栽培下脚料中虫草多糖的提取,热水提取法优于超声波:水提法;虫草素的提取,超声波酒精提取法略优于热水提取法、酒精热回流提取法和超声波水提取法。3、通过对影响虫草多糖和虫草素提取率的单因素进行分析,并通过四因素三水平的正交实验分析,最终确定用水80℃热回流提取3次,90min/次,料液比为1:20的工艺条件为提取虫草多糖的最佳工艺条件;确定用75%乙醇超声波提取三次,20min/次,料液比为1:10的工艺条件为提取虫草素的最佳工艺条件。4、对影响虫草多糖与虫草素提取的工艺条件进行分析并进行综合利用提取放大试验得到综合提取工艺路线。结论为从蛹虫草栽培下脚料中综合提取虫草多糖和虫草素时应用20倍量的水,80℃热回流提取3次,每次2小时,提取液经醇沉法将虫草多糖和虫草素分开,采用Sevage法除去虫草多糖中的蛋白获得虫草多糖粗品;将醇沉上清液加入1%活性炭于60℃水浴中脱色30min,得虫草素提取液,在用阴离子交换树脂层析法分离、纯化虫草素得虫草素精品。经苯酚-硫酸法和HPLC法测定,除蛋白工序后得到的虫草多糖收率均大于5.28%,纯度均高于50%,阴离子交换树脂纯化后得到的虫草素精品的收率均大于0.38‰,纯度均高于97%。5、研究中分别对薄层色谱法、分光光度法、HPLC、红外光谱等在虫草多糖和虫草素的定性和定量测试分析方面进行探索,分别采用苯酚-硫酸法和HPLC对虫草多糖和虫草素进行含量测定,确定了不同纯化方法所得虫草多糖、虫草素的含量差异。对虫草素精品和虫草素标准品红外光谱对比,确定为虫草素。
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