山羊卵母细胞冷冻保存及体外受精的研究

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本文主要采用两种不同组合的冷冻液(VSⅠ和VSⅡ)OPS法玻璃化冷冻不同期(GV、10h、IVM)的山羊卵母细胞,并对冷冻后的卵母细胞进行体外受精实验。主要结果如下:1.用两种不同组合的冷冻液VSⅠ(EG+DMSO)和VSⅡ(PROH+DMSO)冷冻各期(GV、10h、IVM)山羊卵母细胞。经用VSⅠ冷冻液冷冻后,GV期的形态正常率、成熟率、受精率分别为86.2%、25.3%、4.0%;培养10h后的分别为86.7%、25.6%、5.1%;IVM期的冻后形态正常率为87.8%、受精率为13.9%。经用VSⅡ冷冻液冷冻后GV期的形态正常率、成熟率、受精率分别86.9%、23.3%、2.7%;培养10h后的分别为88.0%、24.5%、3.3%;IVM期的冻后形态正常率为86.0%、受精率为13.5%。两组冷冻液对应各期的冻后形态正常率、成熟率和受精率差异均不显著(P>0.05)。2.无论是VSⅠ(EG+DMSO)还是VSⅡ(PROH+DMSO),山羊卵母细胞在GV期、体外培养10h后以及IVM期的冻后形态正常率上差异均不显著(P>0.05);GV期和体外培养10h后的卵母细胞的冻后成熟率差异不显著(P>0.05);但GV期和体外培养10h后卵母细胞的冻后受精率均低于IVM期卵母细胞,差异显著(P<0.05)。3.用获能精子和未获能精子,对成熟卵母细胞进行显微授精后,两组的形态正常率分别为81.5%和82.7%,差异不显著(P>0.05),获能精子组的受精率(28.3%)比未获能的精子组(18.8%)高,但差异不显著(P>0.05)。4.常规体外受精(IVF)的受精率(13.9%)比显微授精(ICSI)(28.3%)的低,两者差异显著(P<0.05)。说明ICSI技术相比较常规IVF更能够提高卵母细胞的受精率。
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