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1研究背景慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps, CRSwNP)是一组多病因导致、多步骤发生、具有高度异质性的鼻粘膜病变,临床特征多表现为高度水肿的鼻腔粘膜垂出于中鼻道,形成单发或者多发的息肉,伴炎性细胞浸润,以嗜酸性粒细胞为主。研究显示,改变的固有免疫和获得免疫、组织重塑、异常的花生四烯酸代谢都有可能对鼻息肉发展产生影响,但其明确的发病机制尚不得而知心。自噬是指细胞在应激状况下,通过清除细胞内的代谢废物、更新细胞结构来维持蛋白质平衡和细胞内环境稳定的方式。目前认为,Beclin1及P62是两种比较重要的自噬标志基因,但自噬在鼻息肉组织中的表达及临床意义的研究少有报道。2目的本研究通过从蛋白质及mRNA水平上分别检测自噬标志基因Beclin1及P62在鼻息肉组织中的表达,初步探讨自噬在鼻息肉发病机制中的作用及其临床意义。3方法标本取自2014年10月至2015年4月于山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉头颈外科住院行鼻内镜手术的患者。其中包括慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)患者的鼻息肉组织50例(男26例,女24例,年龄24-71岁,平均47.1岁)作为实验组；单纯鼻中隔偏曲患者的正常下鼻甲粘膜组织20例(男12例,女8例,年龄18-54岁,平均35.2岁),作为对照组。慢性鼻窦炎(Chronic Rhinosinusitis,CRS)诊断标准参照2012年昆明指南。所有患者术前1月内均未接受抗菌素、全身及鼻用糖皮质激素等药物治疗,排除肿瘤、免疫缺陷及其他严重的全身性疾病。对照组鼻中隔偏曲的患者经皮肤点刺实验排除过敏性鼻炎,经鼻窦CT检查排除鼻窦占位病变。所有研究对象术前均采用视觉模拟评分(VAS评分)和Lund-Mackay评分进行病情严重程度的评估。本研究经山东大学齐鲁医院医学伦理委员会批准,患者均在知情同意书上签字表示理解并同意。实验首先采用苏木精-伊红(HE)染色来观察鼻息肉组织的一般形态结构并用如下方法来计数嗜酸性粒细胞的比例：高倍镜下随机选取连续的5个视野,计数嗜酸性粒细胞数目及比例,取平均值,如比例大于10%则为嗜酸性粒细胞浸润型鼻息肉(Eosinophilic Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps, ECRSwNP),不足则为非嗜酸性粒细胞浸润型鼻息肉(non-Eosinophilic Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps, nECRSwNP);采用免疫组织化学技术(IHC)检测Beclin1及P62在实验组及对照组中的蛋白表达强度；采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定两组中Beclin1、P62及LC3B mRNA的相对表达水平。以SPSS20.0软件进行统计学分析。4结果自噬相关基因Beclin1及P62在蛋白水平的表达：Beclin1在鼻息肉组织中的表达和对照组相比明显降低,差异有统计学意义(U值为-13.36,P<0.01)；P62的表达较对照组则明显升高,差异有统计学意义(U值为12.99,P<0.01)。但两者表达与嗜酸性粒细胞浸润无明显关联(P值均大于0.05)。自噬相关基因Beclin1及P62在mRNA水平的表达：Beclin1在鼻息肉组织中的相对表达量为0.46±0.17,低于对照组的1.11±0.47,差异有统计学意义(t值为-4.61,P<0.01)；P62在鼻息肉组织中的相对表达量为2.19±0.44,高于对照组1.05±0.33,差异有统计学意义(t值为6.16,P<0.01)；LC3B在鼻息肉组织中的相对表达量为0.46±0.11,低于对照组的0.96±0.25,差异有统计学意义(t值为-4.61,P<0.01)。5结论鼻息肉较正常下鼻甲粘膜组织中Beclin1的表达明显降低,P62表达明显增高,提示鼻息肉组织自噬水平降低,这可能与鼻息肉的发病机制有关。