本论文以聚苯乙烯树脂球为对象，通过氯乙酰化后，分别接枝四乙烯五胺或聚乙二醇链，合成两种新型树脂：PS-TEPA树脂、PS-g—PEG600树脂，用于α-淀粉酶的固定化。系统研究了树脂的接枝条件，固定化酶特性，采用荧光光谱分析方法考察了四乙烯五胺与α-淀粉酶、聚乙二醇600与α-淀粉酶相互作用。主要研究内容如下： 1.单因素扫描实验表明：以二氯甲烷作分散剂，分散8h，在合成温度为85℃，反应时间为12h，投料比为32g四乙烯五胺/g树脂条件下，从氯乙酰化聚苯乙烯树脂合成PS-TEPA型树脂的增重率和氮元素含量最大，分别为75％和8％；用1，4—二氧六环作分散剂，分散4h，在合成温度为35℃，合成时间为6h，投料比为2.875g聚乙二醇钠/g树脂条件下，从氯乙酰化聚苯乙烯树脂合成PS-g—PEG600型树脂的增重率和氧元素含量最大，分别为37％和13％。 2.固定化时间8h，温度为30℃，pH值为8.0是PS-TEPA树脂对α-淀粉酶的最佳固载条件，酶活吸附率和蛋白吸附率最高可分别达到83％和72％；固定化时间10h，温度为40℃，pH值为7.0是PS-g—PEG600树脂对α-淀粉酶的最佳固载条件，酶活吸附率和蛋白吸附率最高可分别达到60％和56％；在一定的浓度范围内，添加戊二醛对固定化酶的活性没有影响。 3.固定化酶与自由酶的催化动力学性能研究结果表明：酶在固定化后的米氏常数Km值下降，对底物的亲和力上升；两种固定化酶的最大反应初速度vmax均比自由酶有所提高；酶在固定后的最适反应温度从40℃分别提高到50℃(PS-TEPA固定化酶)和60℃(PS-g—PEG600固定化酶)，最适pH值范围从pH5～8变宽为pH7～8(PS-TEPA固定化酶)和pH7～10(PS-g—PEG600固定化酶)，增强了酶适应pH值波动的能力；固定化酶的抗沈脱和批式操作性能较好；酶的失活半衰期t1/2在固定化后显著延长，在70℃下，t1/2从1h(自由酶)延长到4.5h(PS-TEPA)和7.5h(PS-g—PEG600)。 4.应用荧光光谱、同步荧光光谱和紫外吸收光谱法分别研究了TEPA和PEG600与α-淀粉酶相互作用的机理。PEG600对α-淀粉酶有荧光敏化作用，斯卡查德(Scatchard)方程离解常数随温度的升高而增大；TEPA对α-淀粉酶有荧光淬灭作用，由Stern—Volmer方程和Lineweaver—Burk双倒数函数方程计算得到的淬灭类型为动、静态淬灭的结合，温度越高，静态淬灭越明显；TEPA与α-淀粉酶之间存在非辐射能量转移作用，平均结合位点数为1.31；同步荧光光谱证明添加PEG600会对酪氨酸残基的微环境产生很大的影响，添加TEPA只改变了色氨酸残基的微环境。