丹参(Salvia miltiorrhiza)为唇形科鼠尾草属多年生双子叶植物,其干燥根及根茎是我国传统中药材之一,CRISPR/Cas9为一种新型定点基因编辑技术。本研究基于CRISPR/Cas9技术,以酚酸类成分含量较高的山农丹参1号为材料,确定在该技术中应用较多的筛选剂潮霉素的筛选浓度以及适合丹参的除菌抗生素的种类和浓度。采用单因素试验和正交试验设计从超声波预处理时间、乙酰丁香酮浓度、侵染浓度、侵染时间四个因素进行探索,对农杆菌介导的丹参遗传转化体系进行优化,然后以丹参酚酸合成途径中的关键酶基因SmPAL1为目标基因对其进行编辑。对SmPAL1基因的靶位点进行体外靶点效率检测并构建CRISPR/Cas9载体,通过农杆菌介导的遗传转化方法将构建好的VK005-03表达载体转入丹参受体材料山农丹参1号中,获得了新的转基因植株。主要结果如下:1、通过对丹参愈伤组织诱导优化,潮霉素浓度的筛选,除菌抗生素的筛选以及超声波预处理时间、侵染浓度、乙酰丁香酮浓度、侵染时间四个因素进行单因素试验和正交试验,获得了一套稳定高效的丹参遗传转化体系。2、设计了3个CRISPR/Cas9靶位点(SmPAL1-g1、SmPAL1-g2、SmPAL1-g3),通过体外酶切法进行靶点效率检测,其活性分别为53.3%、76.6%和10.0%,将筛选出活性较高的2个靶位点SmPAL1-g1和SmPAL1-g2构建到载体VK005-03中并命名为VK005-03-g1和VK005-03-g2。3、获得了16株含有潮霉素抗性基因的植株,部分植株表型出现异常,总酚含量有所下降。