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随着环境中难降解物质的不断增加,白腐真菌凭借着其功能强大的木质素降解酶系统在水污染治理领域具有广阔的应用前景。但是由于该菌天然条件下生存在固体环境中,在反应器中的液体环境下难以繁殖生长和产酶,导致白腐真菌的应用一直迟滞不前。因此,研究白腐真菌的固定化培养技术,寻求扩大化培养的合适策略就具有重要的意义。 本研究以白腐真菌的代表菌种黄孢原毛平革菌为研究对象,在开发出一种针对黄孢原毛平革菌的新型载体的基础上,一方面考察了新型载体对黄孢原毛平革菌的负载特性,以及新型载体对该菌生长的生物量的影响和该菌负载后产MnP和LiP的情况;另一方面考察了黄孢原毛平革菌在新型载体上的繁殖和再生长策略,最终实现该菌固定化后的良好的繁殖、生长和产酶性能。 据考察,新型载体即打结棉线对黄孢原毛平革菌的负载性能良好,载体的形状有利于该菌的生长。载体的长度对搅拌条件下的载体缠绕有着决定性的作用,适合扩大化培养的载体长度为17mm。在载体投加量对该菌的生物量的影响实验中,使用韩国培养基条件下,70个/100mL培养基的载体投加量能够获得最大的生物量。 在考察黄孢原毛平革菌负载后的产酶特性时,从获得酶活的高峰和稳定性综合考虑,70个/100mL和80个/100mL的分别是产MnP和产LiP的最佳载体投加量,可分别获得约1300U/L和900U/L的高峰酶活。添加打结棉线载体能够使酶活在下降期出现一个平缓期,提高MnP和LiP的稳定性,使培养体系在4-5天内保持相对较高的酶活。 使用菌丝繁殖对液体培养黄孢原毛平革菌是一种可行的繁殖策略。通过高速机械搅拌对菌丝进行打断,对悬浮培养的菌丝球来说,最优条件为1400rpm,4min;而对于棉线载体上的菌体来说,最优条件为1400rpm,6min。打断后的菌丝对打结棉线载体的附着性能和再生长性能良好,远优于聚氨酯泡沫载体,在预培养时间为3.5天的条件下,每个打结棉线载体上获得了0.01538g的生物量。