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第一部分:PLGA/PEDF乳剂的制备以及表征的测定 目的: 制备以聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)包裹色素上皮衍生因子（PEDF）的纳米微球。 方法: 通过复乳溶剂挥发法制备PLGA纳米粒子，利用透射电子显微镜及激光粒度仪对其一般特性进行分析； 结果: PLGA/PEDF乳剂中是由150nm的灰核黑壳的均匀纳米粒组成的。PLGA和PLGA/PEDF乳剂在以去离子水为溶剂的粒径测量中粒子的粒径分别为153nm和200nm，引入PEDF的前后PLGA的zeta电位分别为-20.5和-5.2。在PLGA乳剂的图谱中，1100和1160cm-1处的峰是C-C和C-O键的吸收峰，1756cm-1处的峰是C=O键的吸收峰，与PLGA乳剂相比，PEDF的特征键N-H和C=C键很明显地在在2800和2000cm-1处被表征出来。 结论: TEM、DLS和红外光谱表明，PLGA包裹的纳米尺寸的PEDF乳剂制备成功。 第二部分:细胞毒性试验 目的: 观察和检测PLGA/PEDF乳剂的细胞毒性。 方法: 细胞用37.5 cm2的培养瓶培养在37℃，5% CO2，饱和湿度的培养箱中，培养基为含10%胎牛血清和1%青-链霉素的DMEM培养基。采用CCK-8试剂盒检测PLGA/PEDF乳剂的细胞毒性。简述方法如下，人晶状体上皮细胞（SRA01）及人脐静脉内皮细胞（HUVEC）细胞以5000个细胞每孔的密度分别接种至96孔板。48小时后，去除原来的100μL培养基，换上含有不同浓度的PLGA/PEDF乳剂的培养基，对照组还是加入正常的培养基。培养24，48 h后，弃上清液，加入含有10%CCK-8试剂的培养基，每孔100μL，将其放入37℃培养箱中，孵育4小时，用iMark酶标仪(Bio-Rad，美国)检测每孔在450nm波长处的吸光度。 结果: 细胞毒性实验显示PEDF/PLGA乳剂有良好的生物相容性，对人晶状体上皮细胞（SRA01）增殖的抑制作用有限，轻微的细胞数量减少可能和PLGA的细胞毒性相关，这些结果和之前文献报道相似。对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖的抑制作用显著。 结论: 细胞毒性显示对HUVEC细胞增殖的抑制比对SRA01细胞更好。这可能和PEDF/PL GA乳剂对HUVEC细胞表达VEGF的抑制作用相关，从而引起HUVEC细胞存活率下降。 第三部分:PEDF对氧诱导小鼠OIR模型视网膜巨噬细胞系-小胶质细胞活化的调控作用 目的: 了解PEDF对氧诱导小鼠OIR模型视网膜巨噬细胞系-小胶质细胞活化的调控作用，初步探讨PEDF抑制新生血管形成的可能机制。 方法: 新生C57BL／6J新生小鼠96只，随机数字表法分为正常对照组、OIR模型组；OIR模型组中，右眼为PEDF治疗组，左眼为磷酸盐缓冲液(PBS)干预对照组。除正常对照组外，其余小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)％的氧箱内饲养5 d后转移至正常环境中饲养5 d，建立OIR模型；正常对照组小鼠始终置于正常氧环境饲养；OIR模型组小鼠出氧箱后不作任何处理。12日龄时，PEDF治疗眼（小鼠右眼）玻璃体注射2μg／μl的PEDF lμl；PBS干预对照眼（小鼠左眼）玻璃体腔注射等量PBS。处死小鼠，分离眼球，用iba1对视网膜小胶质细胞进行标记，冰冻切片荧光染色观察视网膜巨噬细胞系-小胶质细胞的活化情况；蛋白免疫印迹法(Western blot)观察小鼠视网膜iba1蛋白表达量。 结果: 荧光显微镜观察结果显示，OIR模型组较正常对照组巨噬细胞系-小胶质细胞数量明显增多，差异有统计学意义(P<0．001)，OIR模型组中PEDF治疗眼较PBS治疗眼小鼠眼内的巨噬细胞系-小胶质细胞数量明显下降，差异有统计学意义(P<0．001)；OIR模型组和OIR组PBS治疗眼巨噬细胞系-小胶质细胞数量相似，两组间差异无统计学意义(P>0．05)；Westernblot结果显示OIR模型组中PEDF治疗眼较PBS治疗眼小鼠眼内的巨噬细胞系-小胶质细胞iba1蛋白表达明显减少，差异显著，有统计学意义(P<0．001)；. OIR模型组以及OIR组PBS干预眼巨噬细胞系-小胶质细胞iba-1蛋白表达急剧增加，两组间差异无统计学意义P>0．05)。OIR模型组中PEDF治疗眼和正常对照组小鼠眼内的巨噬细胞系-小胶质细胞iba-1蛋白表达相似，差异无统计学意义(P>0．05)； 结论: PEDF可以抑制氧诱导小鼠OIR模型视网膜巨噬细胞系-小胶质细胞活化。