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第一部分目的:探讨c-erbB-2与c-raf-1基因反义寡核苷酸联合转染对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用及其分子机制。 方法:实验分成7组:正常对照组、c-erbB-2正义治疗组、c-raf-1正义治疗组、c-erbB-2反义治疗组、c-raf-1反义治疗组、全剂量联合治疗组和半剂量联合治疗组。脂质体转染后不同时间分别进行MTT试验、集落形成试验、细胞周期检测、电镜检测、荧光显微镜检测、RT-PCR、蛋白质荧光强度测定,以观察不同条件处理后各组细胞的增殖、凋亡、细胞周期、mRNA及蛋白质表达有无差别。 结果:就全剂量联合治疗组和半剂量联合治疗组而言,转染72h的OD值分别为0.151(p﹤0.005)和0.073(p﹤0.005),增殖抑制率分别达到了88.7%和94.5%,克隆形成率分别为19.4%(p﹤0.01)和12.8%(p﹤0.01),凋亡率分别为24.3%(p﹤0.05)和31.5%(p﹤0.01),明显地下调c-erbB-2与c-raf-1基因mRNA及其蛋白质的表达水平。 结论:在卵巢癌的基因治疗中,c-erbB-2与c-raf-1基因反义寡核苷酸联合治疗优于单反义治疗,半剂量联合又优于全剂量联合治疗。关键词:SKOV3细胞; 反义寡核苷酸; 联合转染; 卵巢癌