GK大鼠海马组织中Trx/Txnip表达的影响

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目的观察硫氧还蛋白(Trx)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)在糖尿病大鼠海马组织中的表达情况。方法1分组及饲养随机选取20只体重为290±10g的SPF级13周龄雄性GK(Goto-Kakizaki)大鼠作为糖尿病组(DM组,随机血糖≥11.1mmol/L),以及20只体重为290±10g的SPF级13周龄雄性Wistar大鼠作为正常对照组(NC组)。标准饲料喂养,自由进食水。实验室要保持清洁,良好通风,提供适宜的温度、湿度及室内风速,保持充足的光照时间。2一般情况观察观察记录大鼠的毛色、精神状态,在喂养的第2、10周检测大鼠血糖及体重变化。3制备标本及观察指标两组大鼠于断尾取血后均出现因炎症导致的死亡。喂养10周后,给予10%水合氯醛腹腔注射(3ml/kg)麻醉,断头处死两组大鼠(DM组17只及NC组19只),留取脑组织;行HE染色观察大鼠海马组织形态,行免疫组织化学分析、蛋白印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织中Trx/Txnip蛋白含量。结果1一般情况观察NC组大鼠血糖水平正常,毛色光亮,精神状态良好、反应灵敏,体重稳定增长。DM组大鼠血糖水平明显升高(喂养10周后,空腹血糖浓度NC组5.09±1.01 vs.DM组12.58±1.46,p<0.001),且具备糖尿病代谢综合征的表现,精神萎靡、反应迟钝等表现。但两组大鼠体重无明显差异(喂养10周后,NC组503.45±11.02g vs.DM组479.62±12.18g,p>0.05,差异无统计学意义)。2 HE染色结果NC组海马神经元形态正常,细胞膜结构完整、胞质丰富、胞核完整且细胞排列整齐。DM组海马神经元细胞形态不规整,细胞膜失去了完整的结构、胞质及细胞器减少,细胞排列紊乱,正常数量的神经元细胞明显减少。3免疫组化结果Trx、Txnip在海马组织CA1区的阳性表达均为胞浆呈棕黄色颗粒,DM组Trx/Txnip蛋白表达量明显高于NC组(p<0.05)。4 western blot结果DM组海马CA1区Trx的表达量明显高于NC组(1.94±0.27 vs.1.00±0.31,p<0.05);DM组海马CA1区Txnip表达量明显高于NC组(2.65±0.38 vs.1.00±0.15),p<0.001)。结论1糖尿病大鼠海马CA1区神经元细胞形态不规整,细胞膜失去完整性,胞质及细胞器减少,细胞排列紊乱。2糖尿病大鼠海马CA1区氧化应激相关蛋白Trx/Txnip表达增多。
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