鼠妇的镇痛、抗炎作用及化学成分研究

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鼠妇为鼠妇科动物平甲虫(Armadillidium Vulgar)的干燥全体,又称潮虫、地虱、西瓜虫、平甲虫。鼠妇分布广,河北、山东、江苏、浙江等地都有发现。鼠妇主要含蛋白质、蚁酸,具有平喘、通经利尿、解毒止痛作用。国内曾有报道,鼠妇可用于晚期肝癌的止痛等。为了充分利用我国的中药资源,寻找鼠妇的活性成分,我们对鼠妇提取物进行了镇痛抗炎的药理研究和化学成分研究,为鼠妇药材资源的开发利用提供一定的实验依据。本课题通过小鼠醋酸扭体镇痛实验、二甲苯致小鼠耳廓肿胀抗炎实验、COX酶抑制剂体外检测实验,研究鼠妇乙醇提取物与水提物的镇痛抗炎作用。结果表明鼠妇醇提物与水提物能明显延缓小鼠开始扭体时间和减少小鼠的扭体次数,具有镇痛的作用;鼠妇醇提物与水提物均能抑制小鼠耳廓肿胀,具有明显的抗炎作用;鼠妇醇提物对COX-1、COX-2有明显的抑制作用,其IC50值为33.1μg·mL- 1和66.3μg·mL- 1,鼠妇水提物对COX-1、COX-2有明显的抑制作用,其IC50值分别为46.8μg·mL- 1和42.2μg·mL- 1。本课题对鼠妇提取物中的化学成分进行了研究,鼠妇粉碎后,用95%乙醇提取3次,浓缩,依次用氯仿、正丁醇和水进行萃取,采用色谱分离、纯化方法对鼠妇乙醇提取物进行提取和分离,并利用各种理化性质及波谱技术鉴定鼠妇醇提物中的化学成分。从鼠妇乙醇提取物中分离得到的化合物主要为甾醇类,分别为β-谷甾醇、5-烯-3β胆甾醇、麦角甾醇、7α-羟基胆甾醇、7β-羟基胆甾醇,另外还含有有机酸与氨基酸类,分别为正十八酸、顺式9-十八烯酸,丙氨酸,脯氨酸,桂皮酸。我们选取了7α-羟基胆甾醇、7β-羟基胆甾醇这两个具有代表性的化合物进行COX酶抑制作用研究,发现7α-羟基胆甾醇对COX-1、COX-2有明显的抑制作用,其IC50值分别为32.4μg·mL- 1和9.2μg·mL- 1。7β-羟基胆甾醇对COX-1、COX-2有明显的抑制作用,其IC50值分别为40.1μg·mL- 1和13.7μg·mL- 1,。由此可以得出甾醇类化合物可能为鼠妇乙醇提取物镇痛抗炎的有效成分。本课题采用超滤--液质联用法对鼠妇水提物中COX-2的抑制成分进行了探索,发现鼠妇水提物中含有能与COX-2酶结合的化学成分。通过分子量检索,我们得到了化合物的分子式,为下一步进行鼠妇水提物中有效成分研究奠定了基础。本课题用不同的模型证实了鼠妇醇提物和水提物具有显著的镇痛以及抗炎作用,并从鼠妇的醇提物中分离到一些单体成分,主要是甾醇类和氨基酸类的化合物,为鼠妇药材的药理和化学成分的研究提供了依据,为其临床的合理应用提供了参考。
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