氟苯虫酰胺抗性对小菜蛾生殖的影响机制初探

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小菜蛾(Plutella xylostella L.)为重要的十字花科蔬菜害虫,因其生命周期短、世代重叠严重、繁殖能力强以及生产中不合理用药,使得其对绝大多数杀虫剂产生了抗药性。氟苯虫酰胺因其新颖的作用靶标,良好的速效、持效性以及对哺乳动物的低毒性等优势而得到广泛应用,但小菜蛾对氟苯虫酰胺的抗性问题也越来越突出。为探讨小菜蛾对氟苯虫酰胺的抗性与生殖发育之间的关系,本项目以敏感品系(S)、室内筛选的氟苯虫酰胺抗性品系(R_f)、田间抗性种群(R_b)三个品系/种群为研究对象,分别利用荧光定量PCR和超高效液相串联质谱法等多种方法开展研究,得到的结果如下:1.在前期抗性汰选的基础上,继续采用浸渍法获得了对氟苯虫酰胺抗性达946.95倍的高抗小菜蛾品系(R_f),且鱼尼丁受体4946位点基因型为GAG。测得小菜蛾田间抗性种群(R_b)对氟苯虫酰胺的抗性倍数1115.06倍。2.为进一步研究小菜蛾生殖与抗性之间的作用机制,用荧光定量PCR分析比较抗性小菜蛾和敏感品系小菜蛾成虫卵黄原蛋白(PxVg)基因、卵黄原蛋白受体(PxVgR)基因、保幼激素受体(PxMet)基因和海藻糖酶(PxTre)基因的表达差异,结果表明,抗性品系/种群上述基因不同时期表达量相较于敏感品系而言均有不同程度的提高。3.采用酶联免疫法对小菜蛾雌蛾不同羽化时间卵黄原蛋白含量的测定,结果表明,抗性试虫的卵黄原蛋白含量均有不同程度的升高,且羽化后12h卵黄原蛋白含量降低,可能被卵巢摄取,随后含量开始逐渐升高。4.采用UPLC-MS/MS方法,检测4龄抗性和敏感小菜蛾成虫血清中保幼激素和蜕皮激素的含量,发现抗性品系/种群两种激素的含量相较于敏感品系而言均有不同程度的提高,且差异性显著。与卵黄原蛋白基因和卵黄原蛋白受体基因的表达量呈正向相关性。5.本文对小菜蛾不同品系/种群海藻糖酶(PxTre)基因相对表达量、海藻糖酶活力进行了测定,结果表明抗性品系/种群各时期表达量和酶活力均高于敏感品系。
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