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背景与目的：热休克蛋白(Heat shock protein, HSP)是生物体在对各种物理、化学和微生物应激时启动的一组因热休克基因表达而产生的特殊蛋白质,它们能快速调整应激过程中细胞的存活机能,保护细胞抵御损伤并有助于细胞恢复正常的结构和机能。心肌缺血再灌注损伤(Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury, MIRI)是指缺血期处于可逆损伤的心肌细胞恢复血液供应后产生更为严重的损伤,其保护作用的机制均与诱导产生热休克蛋白有关。本课题拟用已经构建的HSP22过表达的小鼠模型,应用该模型研究HSP22在心肌缺血再灌注损伤中的作用,阐明HSP22对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制,为研制减少心肌梗塞、预防心肌疾病的药物打下基础。方法：对经PCR、测序和Southern Blot分析证实的转基因首建鼠,稳定传代后,取F4代小鼠的鼠尾提取DNA,经PCR,测序鉴定出HSP22转基因小鼠。采用体重和年龄均无显著性差异的F4代野生型C57BL小鼠(对照组,n=5)和pCAGGS-HA-HSP22转基因C57BL小鼠(实验组,n=5)制作心肌缺血再灌注损伤的模型,取其心脏标本,通过免疫组化测定两组小鼠心肌HSP22蛋白的含量,应用直接化学法检测缺血再灌注后心肌组织中丙二醛(MDA)和的蛋白质羰基浓度。对所得结果进行统计学分析,比较两组心肌组织HSP22蛋白的含量,丙二醛的浓度,蛋白质羰基化程度的差异是否有统计学意义,分析HSP22蛋白对缺血再灌注后脂质氧化损伤及蛋白质氧化损伤是否有保护作用。结果：1.对携带人类野生型HSP22基因的转基因小鼠传代后的F3,F4代小鼠进行鼠尾DNA测序,成功鉴定出HSP22过表达的转基因小鼠。2.对照组和实验组经心肌缺血再灌注损伤的模型后的心肌组织中均有HSP22的蛋白表达,两组蛋白主要在胞浆表达。实验组小鼠的PI值为10.21土4.75,较对照组小鼠的PI值4.19±1.12明显升高,P<0.05,差异显著。3.两组小鼠MDA测定结果对照组MDA含量为193.89±27.61明显高于实验组82.96±29.14,P<0.05,差异显著。4.两组小鼠蛋白质羰基测定结果对照组蛋白质羰基含量为21.56±9.12明显高于实验组6.56±1.99,P<0.05,差异显著。结论：1.携带人类野生型HSP22基因的转基因小鼠能在F3,F4代中稳定传代。2.经心肌缺血再灌注损伤模型后的小鼠心肌组织中HSP22的表达量实验组明显高于对照组。3.HSP22在心肌缺血再灌注损伤中通过降低心肌脂质过氧化和蛋白质过氧化产生保护作用。