【摘 要】
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该课题的研究是以18C型荚膜多糖为半抗原,将其与蛋白质载体-破伤风类毒素化学结合构建的多糖-蛋白质结合物则可使多糖抗原转变为胸腺依赖性抗原(Thymusdependentantigen,TD-A
【出 处】
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兰州医学院 兰州大学医学院 兰州大学
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该课题的研究是以18C型荚膜多糖为半抗原,将其与蛋白质载体-破伤风类毒素化学结合构建的多糖-蛋白质结合物则可使多糖抗原转变为胸腺依赖性抗原(Thymusdependentantigen,TD-Ag),可以克服多糖抗原的不足,制备成结合疫苗.实验中分离、纯化18C型肺炎荚膜多糖后,采用溴化氰(CNBr)激活多糖上的羟基,用无水已二酸二肼(ADH)作为连接剂,用1-乙基-3-(3-二甲基氨基-丙基)-碳化二亚胺(EDAC)为蛋白质羧基激活剂活化蛋白质,从而将多糖与破伤风类毒素(TT)连接成多糖-TT结合物,然后以10ug多糖和含2.5ug多糖的结合物经腹腔免疫Bal/bc品系小鼠,分离免疫后的小鼠血清,对ELISA方法各条件进行测试,探讨应用ELISA法检测小鼠荚膜多糖抗体水平及TT抗体水平.结果显示:用该方法提取的荚膜多糖及多糖衍生物、多糖-蛋白质结合物都具有肺炎链球菌18C型的抗原特异性;单独用多糖免疫小鼠未能诱生高水平的抗体,而结合物免疫小鼠却诱生了较高水平的型抗体和TT抗体,并且产生的抗体存在着免疫记忆性,可以产生再次免疫应答加强反应.该实验证实利用肺炎链球菌18C型荚膜多糖与破伤风类毒素构建的多糖-蛋白质双价结合疫苗在小鼠体内具有较强的免疫原性,为进一步评价结合物的体内保护效果提供了实验基础.利用间接ELISA法可检测荚膜多糖特异性IgG抗体,以评价单独多糖与多糖蛋白结合物在小鼠体内诱生的抗体水平的不同.
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