【摘 要】
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分子印迹整体柱技术融合了分子印迹技术的高选择性和整体柱的高效分离能力的优势，是近年来快速发展的一种新颖的分离技术。但是将这种技术应用于蛋白质的富集和分离尚在起步阶
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分子印迹整体柱技术融合了分子印迹技术的高选择性和整体柱的高效分离能力的优势，是近年来快速发展的一种新颖的分离技术。但是将这种技术应用于蛋白质的富集和分离尚在起步阶段。
本论文将蛋白质分子印迹技术与有机整体柱结合在一起，研究了以多巴胺(dopamine)为功能单体的溶菌酶(Lyz)蛋白质分子印迹整体柱的制备，本论文的工作主要分为以下三个部分：
第一部分，概述了蛋白质印迹技术，整体柱技术，以及分子印迹整体柱技术的基本理论及发展应用。
第二部分，合成甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)-二乙烯苯(DVB)的有机整体柱骨架，并对其制孔剂选择、单体和交联剂比例及合成条件进行了优化。经电镜扫描、流速-背压关系及压汞考察，该整体柱骨架具有良好的孔径结构。以该骨架为基质，利用甲基丙烯酸缩水甘油酯富含的环氧基团采用Schiff法固载模板蛋白溶菌酶，以多巴胺为功能单体，二次聚合于基质表面，制备共价型溶菌酶蛋白质分子印迹整体柱，并对其识别性能进行了探索。
第三部分，以甲基丙烯酸缩水甘油酯-二乙烯苯的有机整体柱骨架为基质，多巴胺为功能单体，采用表面非共价键印迹法制备了多巴胺包覆的溶菌酶印迹整体柱。利用多巴胺含有的苯环与有机整体柱骨架上的苯环的π-π电子配对作用，将模板蛋白溶菌酶包覆在整体柱基质表面，形成的2D印迹孔穴在最优高效液相色谱条件下，对目标蛋白溶菌酶具有良好的识别作用，印迹因子达到了5.04。并利用该印迹整体柱进行了实际样鸡蛋清中溶菌酶的分离分析，取得了满意的结果。该整体柱与共价印迹法制备的溶菌酶印迹整体柱相比具有更好的识别性能及稳定性。
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