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近年来,随着大量免疫抑制剂、化疗药物和广谱抗生素的广泛应用,侵袭性念珠菌感染(invasive candidiasis, IC)的发病率和死亡率不断上升。但因缺乏特异的临床症状,且血培养和组织病理学检查这两种确诊方法缺乏敏感性,往往延误治疗,因此亟需更快速、敏感的方法用于IC的诊断。国内外学者已经把注意力集中于用血清学方法检测患者血液中的白念珠茵特异性抗原、抗体及代谢产物上。研究表明白色念珠菌H3K4甲基转移酶是IC血清学诊断中的一个候选抗原。目的原核表达白色念珠茵H3K4甲基转移酶N末端肽段(N-terminal region of histone3lysine4methyltransferase, Setl-208p),建立检测人血清中抗Setl-208p IgG类抗体的ELISA方法,评估其在IC中的早期诊断价值。方法对GenBank报道的白色念珠菌H3K4甲基转移酶(histone3lysine4methyltransferase, Setlp)与其他物种H3K4甲基转移酶进行序列比对,选择与人类无同源性的抗原特异性片段,设计一对引物,以白色念珠茵C1标准株基因组DNA为模板,PCR扩增Setl-208p的编码基因,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组菌,并用IPTG诱导重组蛋白质表达,Talon金属亲和柱层析纯化后用抗his标签的单克隆抗体进行鉴定。纯化的Setl-208p一方面用于免疫家兔,制备多克隆抗体。另一方面用于建立检测人血清中相应IgG类抗体的ELISA方法,并评估其在家兔感染模型以及IC患者中早期诊断价值。结果成功克隆了白色念珠菌抗原特异性H3K4甲基转移酶片段Setl-208p基因,制备了相应的工程菌株,诱导表达并获得了纯化的重组肽段,所得蛋白约为29kDa,带有His标签,经western blot鉴定表明诱导的重组蛋白可与IC病人血清发生特异性反应；制备了针对白色念珠菌Setl-208p的兔抗血清,western blot结果显示特异性良好;建立了检测抗白色念珠茵抗Setl-208p抗体的ELISA方法,以该法检测兔模型血清,在感染第4天开始抗体阳性,病人血清检测结果显示,该方法对IC的诊断敏感性为79.2%,特异性为90%,且与细菌感染及其他真菌感染病人(如曲霉)无非特异交叉反应。结论成功表达了白色念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Setl-208p重组蛋白质,建立了检测抗Setl-208p抗体的ELISA法,证明该方法对IC的诊断具有潜在应用价值。