十二烷基苯磺酸钠(SDBS)是一种人工合成的阴离子表面活性剂,因其具有生产工艺成熟且成本低廉,易产生泡沫且去污能力强等特点,被广泛应用于洗涤剂的生产中。随着人们生活水平的不断提高,越来越多的表面活性剂排放到环境中,成为一种与人类关系密切的、重要的环境污染物,其暴露过程中对人类健康产生的影响引起了社会的广泛关注。目前已有对其毒性研究的相关报道,但主要以动物实验为主,从分子水平上解释阴离子表面活性剂与蛋白质毒性作用的研究,尚少有报道,阴离子表面活性剂对蛋白质的毒性作用及机理尚未阐明。蛋白质是由二十余种氨基酸按照一定的顺序通过肽键脱水缩合形成的,具有较为稳定构象的一类生物大分子。它是生物体的重要组成成分,是生命功能的执行者。环境中的污染物通过人体的呼吸系统、消化系统以及皮肤进入体内,与体内的蛋白质相互作用,会破坏或影响其生物功能,威胁人体健康。因此,对SDBS和蛋白质毒性作用的研究,已成为环境与健康领域的重要研究课题。本文分别以过氧化氢酶(CAT)和胰蛋白酶为靶分子,利用光谱学技术(荧光光谱、同步荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱)、酶活性测定和分子对接模拟技术研究了十二烷基苯磺酸钠(SDBS)与过氧化氢酶(CAT)、胰蛋白酶毒性相互作用机理。研究结果如下：1SDBS与CAT毒性相互作用的研究在模拟人体生理条件下,利用荧光光谱(荧光发射光谱和同步荧光光谱)、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱以及分子对接模拟(MOE)等手段研究了SDBS对CAT结构和功能的影响机理。荧光光谱结果表明,随着溶液中SDBS浓度的增大,CAT的荧光光谱出现了明显的猝灭现象,且猝灭类型为静态猝灭,二者之间形成了新的复合物。通过Stern-Volmer方程和热力学方程计算得到的热力学常数△H°>0、△S°>0表明,SDBS与CAT的作用力类型为疏水作用力,结合比为1：1。同步荧光光谱结果表明,随着SDBS的加入造成CAT结构中的酪氨酸(Tyr)残基周围的极性降低,疏水性增强。紫外-可见吸收光谱和圆二色谱的结果表明,SDBS使CAT结构变得松散,蛋白质二级结构发生改变(α-螺旋含量降低)。酶活性测定表明,随着SDBS染毒剂量的增加和染毒时间的延长,CAT的酶活性出现了明显的降低。分子对接模拟结果表明,SDBS进入了CAT的活性位点口袋,干扰和阻碍了过氧化氢分子(底物)进入活性位点中心区域,从而抑制了CAT的活性。2SDBS与胰蛋白酶毒性相互作用的研究同样的,我们对SDBS与胰蛋白酶的相互作用机理进行了研究。荧光光谱结果表明,体系中的SDBS明显的猝灭了胰蛋白酶的荧光信号,且猝灭类型为静态猝灭,表明SDBS与胰蛋白酶发生了相互作用,二者之间形成了新的复合物。通过Stern-Volmer方程和热力学方程计算,得出△H°<0、△S°>0,表明SDBS通过静电作用力与胰蛋白酶结合在一起。同步荧光光谱结果表明,随着SDBS的加入造成胰蛋白酶结构中的酪氨酸(Tyr)的微环境改变。紫外-可见吸收光谱和圆二色谱的结果表明,SDBS使胰蛋白酶结构变得松散,蛋白质二级结构发生改变。酶活性测定表明,SDBS浓度对胰蛋白酶的酶活性具有明显影响。分子对接模拟结果表明,SDBS进入胰蛋白酶活性中心区域,干扰了底物与酶的结合,导致酶活性降低。本文的研究结果表明,SDBS进入体内,能与过氧化氢酶、胰蛋白酶等功能性蛋白酶发生相互作用,形成新的复合物,导致蛋白质的结构和功能发生变化,显示出明显的毒性效应。