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目的:结直肠癌(colorectal cancer)又称大肠癌。作为我国常见的恶性消化道肿瘤之一,发病率有不断升高的趋势,且年龄日趋低龄化,社会危害日趋严重,虽然众多学者已对其进行了广泛而深入的临床及实验室研究,但其发生、发展的确切机制尚不完全明确。 人类相关转录因子3(human runt related transcription factor3,RUNX3)是新近发现的肿瘤抑制基因,此基因其总长约67kb,是定位在人染色体1p36.1,含有跨越了整条基因总长1/2的内含子1(35kb),6个外显子,两个启动子(P1、P2)以及开放阅读框1290 bp,P2较P1 GC含量高,更易于位点突变而调控发生异常。P1、P2启动子内转录起始点为多个且彼此分离,从而能起到多位点的基因调控,抑癌基因RUNX3具有复杂的生物学作用,业界认为其是一种新型的抑癌基因而广为关注,其在结直肠癌中表达较正常组织及良性肿瘤中显著减低,关于RUNX3的特性在各种常见临床肿瘤中的研究结果观点纷呈,甚至部分结果在特定的试验条件下与主流结论则完全悖谬。 本文通过抽样调查的方法选取50例结直肠癌患者,旨在研究部分人群结直肠组织中RUNX3表达的情况,为结直肠癌的临床检测及预后判断提供免疫组织化学依据,丰富RUNX3的研究数据。 方法: 1.材料 2012年3月-2013年3月间50例结直肠腺癌患者,组织取材于河北医大四院结直肠癌专科,根据临床发病规律,取材6例低分化腺癌,取材44例高、中分化腺癌;TNM分期显示T3、T4期43例,T1、T2期7例;淋巴转移:11例(有转移),39例(无转移)。所有组织标本(取材前)均未接受特殊干预治疗,如放化疗、生物免疫等。 2.研究方法 免疫组化SP法:RUNX3细胞浆及细胞核中均可出现,RUNX3阳性是二者内出现棕黄色颗粒。通过反应的程度(范围)和强度计算,最终以染色强度及范围的乘积确定得分;RUNX3的阳性率,染色程度即RUNX3阳性染色所占百分率:小于5%为0分,5%~为1分,25%~为2分,50%~为3分,大于75%为4分;染色强度:0分(无色),1分(浅黄色),2分(棕黄色),3分(棕褐色);强阳性(++)9~12分,弱阳性(+)5~8分,阴性(-)0~4分。RUNX3阳性参照则采用已知阳性切片,RUNX3阴性参照则以PBS替换一抗。 结果: 1.RUNX3蛋白在癌组织中的分布情况:低分化腺癌6例,1例低表达;44例高中分化腺癌,5例低表达。TNM分期:43例≥T3期,1例低表达;7例≤T2期,5例低表达。淋巴转移:11例未见淋巴转移,0例低表达;39例无淋巴转移,5例低表达。年龄分布为>55岁30例,4例低表达;20例≤55岁,2例低表达。性别:男29例,5例低表达;女21例,1例低表达。部位:结肠癌组织34例中4例为低表达;直肠癌组织16例中2例为低表达。结直肠癌中RUNX3蛋白表达与年龄、性别、肿瘤发生部位、组织学分化程度等均无显著相关(p>0.05),而与结直肠肿瘤淋巴结转移呈显著相关性(p<0.05),同时结直肠癌病理组织学分级也密切相关(p<0.05)。 2.RUNX3在肠粘膜正常组织中阳性出现率为96%(48/50),而在结直肠癌组织中的阳性出现率为12%(6/50),可见癌组织细胞中RUNX3表达率明显低于正常细胞(p<0.05)。 结论: 1.结直肠癌组织细胞中RUNX3低表达乃至失表达,在结直肠腺癌病理演变中可能有其重要作用。 2.临床病理学结合检测RUNX3或可为结直肠癌早期诊断、判断预后以及术后监测提供新的思路。