超广谱β-内酰胺酶OXA亚型的研究

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目的: 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)自发现以来医学界对其进行了广泛调查和深入研究。该酶是由质粒介导的、能被β-内酰胺酶抑制剂如棒酸等抑制的、能水解氧亚氨基内酰胺(oxyimineo -lactam)类抗生素如头孢他啶、头孢噻肟以及单环内酰胺类抗生素如氨曲南等酰胺环上的酰胺键的一类酶。其特征是对第三代及第四代头孢菌素高度水解,该酶最初主要由大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌产生,但随着耐药质粒在细菌间的传播,现在可以在许多不同种属细菌中检出,如肠杆菌科的产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、普通变形杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌;非发酵菌中的铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食假单胞菌等。不仅如此,超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)种类也不断增多,现已发现有TEM、SHV、CTX、OXA、MOX、CMY、FOX、MIR、LAT、BIL、BES、IBC、GES、VEB、PER等十几个型别,包括200多个亚种,各型酶间分子构型有较大差异,由分子构型差异造成的耐药性差别也渐趋复杂,研究各型ESBLs成为国内外临床检验工作者的又一重要任务。目前,国外已经有较多关于ESBLs各亚型的研究。 出于地域、环境、医疗水平的差异,以及抗生素应用习惯不同,各地ESBLs的流行情况各不相同。与国外类似,国内也已有很多地区作了这方面的调查和研究,但仅限于本地区流行亚型及耐药情况的分析与总结,方法也多采用聚合酶链反应扩增(PCR)基因片段,经载体转化入大肠杆菌后测序,然后证实哪种亚型,以此揭示其耐药特点。我们也采用传统的PCR方法,有目的的扩增OXA各亚型基因片段,同样经转化、质粒提取测序等步骤,所不同的是我们在此基础上将测序证实为OXA-1基因的产物做了表达、复性、
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