紫花苜蓿GSTP1-L105V和CYP2A6基因转化植株再生体系诱导研究

来源 :青岛科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhangwenhan05
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随着粗放式制造业的极度扩张,我国的土壤重金属和有机物污染问题日益凸显。由于土壤问题与人们的日常食品安全和身体健康息息相关,妥善治理该项污染问题便显得尤为重要。  谷胱甘肽S转移酶基因GSTP1-1105V和细胞色素抗氧化酶基因CYP2A6分别是已证实的与重金属和有机物相关的基因。虽然,野生紫花苜蓿具有一定的累积重金属和分解有机物的作用,但该作用不足以用于治理土壤污染,本文旨在利用农杆菌介导法将上述两种基因导入紫花苜蓿中以提高其抗重金属和有机物能力。  研究中,我们先构建含单个目的基因的表达载体pBI121-GSTP1-1105V。将其导入农杆菌后,再用冻融法将另一目的基因CYP2A6转入农杆菌中。之后,以“金皇后”紫花苜蓿下胚轴作为受体,经过预培养、浸染、共培养、一次脱菌、二次脱菌、继代培养、分化培养、生根培养最终得到具有重金属和有机物抗性的转基因植株共100株。  经PCR和RT-PCR检测和转基因植株对CdSO4和TCE的耐受性试验,我们确认外源基因GSTP1-1105V和CYP2A6被成功地整合到苜蓿基因组上的共有27株,转基因植株对重金属和有机物的耐受性提高显著。
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